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凌晨三点,我的液相层析柱还在“思考人生”
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昨晚纯化一个急要的蛋白样品,液相层析系统突然开始“摸鱼”——目标峰迟迟不出现,基线平稳得像条直线。 检查了泵流速正常,压力稳定,检测器信号也有响应。把样品重新离心过滤,甚至换了新柱子,结果还是一样。盯着屏幕上那条毫无波澜的基线,突然意识到:会不会是缓冲液配错了? 跑回配制台一看,果然!本该加阴离子交换层析所需的低盐缓冲液,手滑拿成了高盐储存液。样品根本结合不上柱子,直接穿流了。 赶紧重配缓冲液,重新平衡系统。看着目标峰终于在凌晨三点多出现在屏幕上,一边庆幸问题解决得早,一边后悔自己检查流程跳了步骤。 这次教训让我明白,液相层析这种看似自动化的流程,其实每个手动环节都可能埋雷。尤其是缓冲液这种天天接触的东西,反而最容易掉以轻心。 想问下论坛里的同行,你们在跑液相层析时,有没有遇到过这种“低级错误”?都是怎么建立防错机制的?欢迎分享那些让你印象深刻的翻车经历。 |
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