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细胞污染问题:原因分析与解决方案
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真菌污染 如果你看到培养皿中出现了絮状、棉絮般的漂浮物,或者有类似蜘蛛网的结构延伸开来️,那多半是被真菌光顾了。显微镜下能看到明显的菌丝结构,有时还会有孢子。真菌生长相对缓慢,但一旦发现,基本就是全军覆没的节奏... 支原体污染 这个是最"阴险"的!肉眼看不出异常,细胞可能生长速度变慢,形态略有改变,但并不明显。支原体污染需要特殊染色或PCR检测才能确认,却会严重影响实验结果! **小tips:**定期用DAPI染色检查支原体污染,蓝色荧光下如果看到细胞核外有许多小点状荧光,就要警惕支原体污染了! 污染源头大起底 操作不当:手套没消毒就乱摸、说话喷沫、超净台未提前开紫外灯...(我承认我都犯过) 试剂污染:过期培养基、冰箱反复冻融的血清、被污染的胰酶等 设备问题:CO2培养箱内壁长期未清洁、水盘变质、超净台风速不稳定 环境因素:实验室空气质量差、近期装修或管道工程、共用培养箱交叉污染 **小tips:**建立"污染日志",记录每次污染的细节和可能原因,长期积累可以发现你实验室特有的污染规律! 预防措施大全 严格无菌操作:75%酒精喷手套,所有物品入超净台前消毒,减少说话 定期清洁设备:每月清洁培养箱,每周检查水盘,每天紫外灯照射超净台30分钟 试剂管理:培养基分装小瓶使用,避免大瓶反复开盖;血清、胰酶等分装冻存 建立习惯:操作顺序从"干净"到"脏",如先处理健康细胞,再处理可疑细胞 **小tips:**在培养基中适当添加青霉素/链霉素抗生素混合液可以预防细菌污染,但记住这只是"保险措施"而非"免死金牌"! 污染应急处理SOS 立即隔离:发现污染立刻将可疑培养皿移出培养箱,放入密封袋中处理 彻底消毒:受污染区域增加消毒频率,培养箱可用75%酒精彻底擦拭 追踪溯源:检查同批次试剂、同一时间操作的其他细胞情况 细胞抢救:轻度污染可尝试高浓度抗生素处理+频繁换液,但成功率较低 毕合生物(www.bihebio.com)提供服务内容:分子生物学、免疫, 重组蛋白及ELISA相关、活性小分子化合物、高端化学、材料化学、细胞资源库与培养相关、生命科学、天然产物 |
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