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毕合生物2024

铜虫 (小有名气)

[交流] 细胞共培养基础:何时需要共培养?✨

嗨,小伙伴们~今天来跟大家聊一聊细胞培养界的"社交达人"——细胞共培养技术!

1️⃣ 什么是细胞共培养?原理竟然这么简单!🔬

简单来说,细胞共培养就是让两种或多种不同类型的细胞在同一个培养系统中一起"生活"。🏠 想象一下,这就像是让不同性格的室友住在同一个公寓,它们会通过各种方式相互交流、影响对方的行为和状态。

在体内,我们的细胞从不是孤立存在的!各种细胞类型通过直接接触或分泌各种信号分子(如细胞因子、生长因子、化学趋化因子等)来相互"沟通"。🗣️ 共培养技术正是试图在体外模拟这种复杂的细胞间相互作用,让我们能更接近地研究真实生理或病理条件下的细胞行为。

三种经典共培养系统大比拼🔍​

亲爱的科研小伙伴们!今天咱们来一场细胞界的"相亲大会"~一起深度了解三种经典共培养系统的"性格特点",帮你找到最适合自己实验的那一款!🧫💞​

1️⃣ 直接共培养系统:细胞间的亲密接触✨​

直接共培养就像是细胞界的"面对面交流",不同类型的细胞混合在同一个培养环境中,可以自由接触交流~简单粗暴但超有效!🔄​

原理:不同细胞类型直接混合在同一个培养板/皿中,允许细胞-细胞直接接触,实现膜蛋白相互作用、缝隙连接形成以及细胞因子的近距离传递。​

优点:​

•最接近体内真实微环境的互作方式💯​

•可以观察到依赖于直接接触的信号传导​

•操作简单,成本低,无需特殊设备​

•适合研究细胞融合、免疫突触形成等现象​

缺点:​

•难以区分哪些效应来自直接接触,哪些来自可溶性因子🤔​

•后期分离不同细胞类型有难度​

•数据分析复杂度高​

适用场景:​

•免疫细胞与肿瘤细胞的杀伤作用研究​

•干细胞分化诱导需要接触信号时​

•神经元与胶质细胞相互作用研究​

💡小贴士:在直接共培养前,可以用不同的荧光标记物预先标记不同细胞群体,便于后期区分和追踪!​

2️⃣ 间接共培养系统:优雅的隔空对话🌈​

间接共培养就像是细胞界的"书信往来"——细胞们隔着一层半透膜"写信"交流,只能交换可溶性因子,却不能直接接触,超级体面又高效!📝​

原理:使用特殊的插入式培养装置(如Transwell®,不同细胞被半透膜隔开,只允许可溶性因子通过,阻止细胞-细胞直接接触。​

优点:​

•可明确区分接触依赖性和可溶性因子介导的效应​

•实验结束后细胞分离容易,无需额外分选步骤​

•可精确控制膜孔径大小,筛选特定尺寸的分子通过​

•便于单独收集和分析不同细胞群体​

缺点:​

•成本较高(Transwell装置价格不菲💰)​

•缺乏直接接触介导的信号通路激活​

•培养空间有限,细胞数量受限​

使用技巧:​

•选择适合你研究的膜孔径(通常0.4μm用于阻止细胞迁移但允许蛋白通过)​

•上下室细胞密度需优化,避免过度拥挤或过于稀疏​

•确保上下室培养基液面高度合适,保证分子充分扩散​

3️⃣ 条件培养基共培养:时空分离的隐形互动🕒​

条件培养基共培养像是细胞界的"接力赛"——先让A细胞"跑一圈"制造各种信号分子,然后收集这份"接力棒"(培养基)交给B细胞继续"跑"!🏃♀️→🏃♂️​

原理:收集已培养过某种细胞的培养基(称为条件培养基/CM),经过处理后用于培养另一种细胞,研究第一种细胞分泌的因子对第二种细胞的影响。​

优点:​

•操作简便,几乎不需特殊设备​

•可以进行时间序列研究,探索不同培养时长的效应​

•便于大规模筛选和高通量实验​

•可储存和运输培养基,方便实验安排​

缺点:​

•缺乏动态双向交流​

•可溶性因子可能在收集、处理过程中降解​

•不能模拟细胞直接接触的效应​

操作方法:​

1.培养供体细胞至适当密度(通常70-80%汇合度)​

2.收集培养基,离心去除细胞碎片(1000g,10分钟)​

3.过滤(0.22μm滤器)确保无细胞污染​

4.可选择浓缩或直接使用于受体细胞

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