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hxdon

铜虫 (著名写手)

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[交流] 关于分子生物学的最新实验技术

分子生物学的实验技术发展实在是太快了！虽然在这个圈里混，但仍有很多不明白的甚至没听说过的实验技能。希望大家踊跃跟帖，收集最新的实验技术！

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1楼2009-11-12 18:31:57

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biozheng

木虫 (小有名气)

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专业: 食品科学基础

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amisking(金币+7,VIP+0): 11-21 19:08

变性梯度凝胶电泳（DGGE）、温度梯度凝胶电泳（TGGE）

原理：双链DNA分子在一般的聚丙烯酰胺凝胶电泳时，其迁移行为决定于其分子大小和电荷。不同长度的DNA 片段能够被区分开，但同样长度的DNA片段在胶中的迁移行为一样，因此不能被区分。DGGE/TGGE 技术在一般的聚丙烯酰胺凝胶基础上，加入了变性剂（尿素和甲酰胺）梯度，从而能够把同样长度但序列不同的DNA 片段区分开来。一个特定的DNA 片段有其特有的序列组成，其序列组成决定了其解链区域(meltingdomain, MD)和解链行为(melting behavior) 。一个几百个碱基对的DNA 片段一般有几个解链区域，每个解链区域有一段连续的碱基对组成。当变性剂浓度逐渐增加达到其最低的解链区域浓度时，该区域这一段连续的碱基对发生解链。当浓度度再升高依次达到各其他解链区域浓度时，这些区域也依次发生解链。直到变性剂浓度达到最高的解链区域浓度后，最高的解链区域也发生解链，从而双链DNA 完全解链。