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科研检测交流
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【不合理蛙科研实验避坑分享】扫描电镜拍叶片气孔避坑记
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| 我采新鲜拟南芥叶片，先剪3×3 mm，背面贴碳胶，立即投入2.5 %戊二醛-PBS 4 ℃固定2 h，轻摇防贴壁。关键：脱水乙醇每级10 min，100 %换3次，叔丁醇4 ℃置换2×20 min，-20 ℃冰箱过夜，次日升华干燥24 h，免临界点。喷金5 mA 40 s，厚约3 nm。经验：叶缘易卷，干燥前用滤纸轻压展平；加速电压15 kV，气孔开度最真，低于10 kV边缘亮；若见荷电，立刻降束流至 spot 2.0，工作距离8 mm；拍背散射像，可辨表皮蜡晶。按此流程，气孔长宽数据与光学显微镜差<5 %，全程48 h完成，省设备预约。 |
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