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大家用细胞扩增系统的时候,有没有遇到过状态不稳定或者效率上不去的问题?
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最近在实验室用细胞扩增系统做一批细胞,产量和状态时好时坏的,折腾得够呛。想着这东西现在用的人应该不少,就上来和大家唠唠,看看有没有遇到类似情况或者有经验的老师给指点指点。 现在的细胞扩增系统确实方便,从摇床到生物反应器,能自动控温控pH控溶氧,理论上细胞该长得又快又好。但实际操作起来,经常遇到些说大不大说小不小的问题。比如明明参数都设对了,细胞长着长着突然代谢就慢了,或者活率开始往下掉;有时候不同批次之间产量波动特别大,重复性不好把握。我们就在琢磨,是培养基成分有细微差别,还是补料策略没调好?或者是不是传代时机和接种密度这些基础操作其实影响比想象中还大? 特别是当体系从摇瓶放大到反应器的时候,那些在摇瓶里长得挺好的细胞,一上系统反而状态不稳定了,溶氧、剪切力这些物理因素的影响好像比预想的明显。不知道大家在实际操作中,有没有总结出什么能让细胞在细胞扩增系统里稳定高效扩增的经验?比如怎么根据代谢数据及时调整策略,或者有没有什么容易被忽略的关键参数需要特别监控? |
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