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pMg36e怎么这么难做啊
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 请教各位大佬：我的质粒是pMg36e，目的基因1500bp左右，酶切位点是SacI和PstI，双酶切最开始连接不上，后来用的套扩目的片段，同源重组连接的，转化涂平板挑单克隆，菌液PCR有条带,质粒跑电泳有条带但也有点杂带，质粒PCR有条带，双酶切验证有条带，委托公司设计引物质粒送测显示没有连接在预期的位置上，又用对质粒测序的引物进行高保真扩增有明显的杂带一个是目的条带一个是空载条带，胶回收目的片段送测测两次都显示无信号。。。真没招了，做大半年了马上毕业了，还没做出来。。。救救孩子吧。 |
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