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内容

在DNA中5-甲基胞嘧啶通过DNA甲基转移酶甲基组的同价原理发生在胞嘧啶环的第五位碳原子上。这个过程很好地被研究并且通常伴随有基因的表达和抑制。尤其是在人类中观测到,5-甲基胞嘧啶发生在各种形式的RNA分子中,包括tRNAs,rRNAs,mRNAs和非编码RNAs(ncRNAs)。5-甲基胞嘧啶看起来都富集于ncRNA这类中,但是相对的在mRNAs中是在减少。 5-甲基胞嘧啶的水平在动物基因组中是不一样的,水平量在一些昆虫中不被发觉的到在人类细胞中大概有0.1-0.45%的总RNA量。大多数(83%)的5-甲基胞嘧啶是在mRNAs中发现的。在这些转录中,5-甲基胞嘧啶在蛋白编码测序中出现减少;而在5’和3’UTRs中出现富集。众所周知,2种不同的甲基转移酶,NSUN2和DNMT2在真核生物RNA中通过催化5-甲基胞嘧啶的修饰形式,会减少5-mC。现在已经有很有力的证据表明:RNA胞嘧啶的甲基化影响着各种生物进化的规则例如:RNA稳定性和mRNA翻译。此外,在拱形RNAs中5-mC的缺失会异常的引起相关的小RNA片段化且这些小RNA发挥着正常的功能。因此,拱形ncRNA的损失可能有助于发现人类因缺失NSUN2而引起的发挥失调。
精确和方便的定量检测5-甲基胞嘧啶是极其的有用。在各种生理学上和病变中,识别和理解发生在RNA上的5-mC甲基化水平的变化是非常有意义的。目前仅有的基于色谱的技术比如:MS-LC对于检测RNA中总体的5-mC水平。然而,这种方法费时,通量低,需要的RNA量多和高成本。为了解决这些问题,我们联合国外知名的表观遗传学公司特别的开发了:总体RNA甲基化极易定量检测试剂盒(荧光法)

本试剂盒有以下优点和特性:

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稳定:这款试剂盒容许分析过程有更大的信号窗口,且复孔只有微小的变化。
方便:内在低背景噪音,可以消除孔板阻断的步骤。
高敏,检测的最低下限为 0.02%的 5-mC RNA,RNA输入量是:200ng 。
特异性:高特异性地结合5-mC,在未甲基化的胞嘧啶或羟甲基化胞嘧啶不会产生交叉反应;针对不同的浓度范围的样本RNA。
普遍性:阳性对照和阴性对照容许对任何物种的RNA,检测5-mC RNA。
精确性:最佳的阳性对照是可以按照一定的百分比,分成几部分,然后绘制标准曲线,精确性更高。结果堪比HPLC-MS色谱分析。甚至更优。
灵活性:96孔可拆卸板模式使研究人员能根据自己需要选择手工或是高通量模式分析。
操作简便、可信、分析条件始终如一。荧光分光光度计可测m5C含量---总体RNA甲基化极易定量检测试剂盒(荧光法)(A-P-9009)

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