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科研战神来了新虫 (小有名气)
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[交流]
为什么RNA比DNA更容易降解呢？
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做过分子实验的任大概都有过被RNA折磨的经历：严格按照流程提的RNA，跑胶却一片弥散；不小心污染了酶，整批样品直接报废的崩溃时刻。而DNA，哪怕操作粗糙点、存放时间久点，依然能保持稳定状态。同样是核酸，为什么RNA就这么脆弱，动不动就降解呢？原因主要有以下三点：01化学结构的差异DNA 由两条互补的脱氧核苷酸链组成，结构相对稳定；而RNA是单链；此外RNA是核糖，DNA是脱氧核糖；RNA核糖的2号碳原子上，比脱氧核糖多了一个羟基（-OH）。羟基的存在使得 RNA 在化学性质上更加活泼，容易参与各种化学反应，进而导致其结构更容易被破坏。比如其易和相邻的磷酸二酯键发生反应，导致RNA链断裂。02酶的作用RNA酶的“分布范围”极广：空气里、灰尘中、实验台面、移液枪头，甚至我们的皮肤表面都藏着大量RNA酶。做实验时哪怕手指不小心碰了一下离心管内壁，或者吸样时带进了一点空气，都可能让RNA酶污染样品。更难搞的是RNA酶耐高温，不像DNA酶遇到高温易失活。三.生理功能决定RNA在细胞中发挥“信使”和“催化剂”功能，比如mRNA传递遗传信息指导蛋白合成、tRNA转运氨基酸，这类功能不需要长期存续。完成任务后，RNA就会被细胞内的RNA酶主动降解，避免合成无用蛋白浪费资源。而DNA是遗传信息的储存库，需要长期稳定保存遗传密码，所以进化出更强的抗降解能力。实验室RNA防降解指南：1. 彻底清除RNA酶：实验前用专用的RNase清除剂擦拭台面、移液枪；所有耗材（离心管、枪头）必须是无RNase的一次性产品。2. 全程低温操作：RNA酶在低温下活性会降低，所以提取过程中（如研磨样品、离心）要全程在冰上进行；提取好的RNA如果短期使用，放-20℃冰箱；长期保存则要放-80℃冰箱，避免反复冻融。3. 及时加保护剂：提取RNA时，在裂解液中加入RNase抑制剂，抑制潜在的RNA酶活性；溶解RNA时，用无RNase的DEPC水，避免水中的RNA酶污染。  |
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