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a83875785

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 【求助】体内分析时,大鼠血浆里检测不出来药物怎么办?急急急已有8人参与

我的样品是黄酮提取物,黄酮母核6位含有甲氧基,微溶于甲醇,水里也不溶,但是在极性小的溶剂乙酸乙酯里也不怎么溶,我将药灌胃给予大鼠后,取出的血浆加甲醇沉淀处理,离心,取上清液进HPLC分析,什么都检测不出来(除了甲醇的溶剂峰),这是怎么回事啊?急急。。。。。。
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a83875785

铁杆木虫 (著名写手)

谢谢楼上的,我用空白血浆+样品,经过沉淀蛋白、离心等前处理步骤以后,发现还是能检测出来的,说明我的提取方法应该没错。
另外我加的是100ul的样品,最后用50uL甲醇复溶,取20ul进HPLC。假设原样品浓度是Cs,那么用50ul复溶后,浓度变为2Cs,,取20ul进样,那么量就是40Cs;原来的100ul样品我也进样20ul,量就是20Cs,我发现经过血浆预处理后,本来样品应该是体外2倍的峰面积(40Cs=2X20Cs)真正检测的时候只有原来的1/8,综合里里外外,即经过血浆预处理后,只能萃取出原来的1/16.这样的萃取方法正常吗?
12楼2009-11-14 22:37:36
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陈林霖

至尊木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教! 11-12 00:26
有几个可能的原因:
1 给药剂量太低
2 取血时间不对
3 不以原形入血
4 药物吸收不良
5 进样溶液太稀
6 血浆蛋白结合
2楼2009-11-11 22:00:30
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bbb555151617

木虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
jw227(金币+1,VIP+0):谢谢参与 11-12 09:12
测不出来的影响因素很多   楼主应该仔细分析一下   是不是可能代谢为别的成份了  在血中并不以原型存在    是不是可能形成二相代谢产物了   冷静分析一下吧
3楼2009-11-11 22:02:02
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zhaoyanqiu

金虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
jw227(金币+1,VIP+0):谢谢参与 12-4 09:17
二楼说的很全面呢,做体内本身就挺复杂的,
不知道你有没有只拿空白血浆加药物,按照你的提取方法制备生物样品,要是能检测出来,就可以说明你的提取方法没有错误
4楼2009-11-11 22:36:43
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