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如何判断哪种失活?
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如何判断是哪种失活? 1. 分析型HPLC: · 如果主峰消失或变小,出现更早洗脱的峰(可能是水解片段),说明发生了化学降解(水解)。 · 如果主峰变小或消失,在进样峰或死体积处出现大峰(不保留物质),或在色谱图末端出现聚集峰,说明发生了物理聚集。 · 如果主峰保留时间发生偏移(通常是提前),旁边出现肩峰或新峰,很可能是发生了脱酰胺(增加负电荷,使其更亲水)。 2. 质谱: · 分子量增加16Da → 氧化。 · 分子量增加1Da或17Da → 脱酰胺(Asn→Asp +1Da,或进一步酸化)。 · 分子量减少18Da → 环化(如天冬酰胺酰亚胺形成)。 · 出现多个小分子量杂峰 → 肽键水解断裂。 发自小木虫IOS客户端 |
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