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氨基酸的分类
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第三步:氨基酸偶联 · 目的:将下一个Fmoc保护的氨基酸通过缩合反应连接到已脱保护的氨基上。 · 操作: 1. 配制活化好的氨基酸溶液: · Fmoc-氨基酸:通常为0.1-0.2 M DMF溶液。 · 缩合剂:如HATU, HBTU等,同等摩尔浓度于DMF中。 · 碱:如N,N-二异丙基乙胺,摩尔数为缩合剂的2倍。 · 将以上三者预活化1-2分钟后,立即加入反应器中。 2. 让偶联反应进行 30-60分钟。对于困难序列或位阻氨基酸,可延长至数小时或进行双重偶联。 3. 排掉反应液。 · 关键细节: · 氨基酸和缩合剂需过量(通常2-5倍),以驱动反应趋于完全。 · 确保氨基酸完全溶解。 · 对于困难序列,使用更强效的缩合剂(如HATU/HOAt)和添加剂(如Oxyma Pure)。 第四步:循环重复(第二步 ? 第三步) · 完成一个氨基酸的偶联后,用DMF充分洗涤树脂。 · 然后重复 第二步(脱保护) 和 第三步(偶联),直至整个多肽序列合成完毕。 发自小木虫IOS客户端 |
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