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新虫 (小有名气)

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[交流] 氨基酸的分类

第三步：氨基酸偶联
· 目的：将下一个Fmoc保护的氨基酸通过缩合反应连接到已脱保护的氨基上。
· 操作：
  1. 配制活化好的氨基酸溶液：
   · Fmoc-氨基酸：通常为0.1-0.2 M DMF溶液。
   · 缩合剂：如HATU, HBTU等，同等摩尔浓度于DMF中。
   · 碱：如N,N-二异丙基乙胺，摩尔数为缩合剂的2倍。
   · 将以上三者预活化1-2分钟后，立即加入反应器中。
  2. 让偶联反应进行 30-60分钟。对于困难序列或位阻氨基酸，可延长至数小时或进行双重偶联。
  3. 排掉反应液。
· 关键细节：
  · 氨基酸和缩合剂需过量（通常2-5倍），以驱动反应趋于完全。
  · 确保氨基酸完全溶解。
  · 对于困难序列，使用更强效的缩合剂（如HATU/HOAt）和添加剂（如Oxyma Pure）。
第四步：循环重复（第二步 ? 第三步）
· 完成一个氨基酸的偶联后，用DMF充分洗涤树脂。
· 然后重复第二步（脱保护）和第三步（偶联），直至整个多肽序列合成完毕。

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1楼 2025-11-06 15:51:14

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