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新虫 (小有名气)

[交流] 集团脱保护的完整步骤、关键细节和注意事项。

第二步:Fmoc基团脱保护

· 目的:移除第一个氨基酸α氨基上的Fmoc保护基,暴露出游离氨基,以便与下一个氨基酸的羧基发生偶联反应。
· 操作:
  1. 排掉溶胀用的DMF。
  2. 加入20% 哌啶的DMF溶液,液面完全覆盖树脂。
  3. 反应 5-10分钟(期间可鼓泡或摇晃)。
  4. 排掉反应液。
  5. 重复步骤2-4一次(双重脱保护),以确保脱保护完全。
· 关键细节:
  · 哌啶溶液需新鲜配制或确保未被稀释,否则脱保护不完全。
  · 观察树脂颜色从无色变为深蓝色是脱保护正在进行的直观标志(Fmoc-哌啶加合物的颜色)。
  · 脱保护后必须彻底洗涤,通常用DMF洗涤5-6次,以去除所有哌啶和副产物。

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