| 查看: 797 | 回复: 0 | |||
科研战神来了新虫 (小有名气)
|
[交流]
根据细胞密度，判断适合做什么实验❓
|
|
不同的细胞密度，适合做的实验都不一样 🌟贴壁细胞90～100%密度： 基本做不了什么实验，只适合传代or冻存，或者细胞转染后长满了然后收细胞检测 🌟贴壁细胞70～80%密度： 细胞处于快速生长期💨，此时适合做转染，或者提蛋白、RNA，也适合加药处理等等… 贴壁细胞转染密度过大会导致转染效率下降，密度过小会影响细胞状态，70～80%刚刚好 🌟贴壁细胞30～40%密度： 适合做慢病毒感染，不适合做转染或加药等实验，病毒感染最好用低密度，感染完毕直接换液等细胞生长即可，后续可筛选或检测感染效果 🔝贴壁细胞如何提高转染效率？ 1、细胞在70～80%转染 2、选择状态很好的细胞，蛋白表达会更好，且转染至少36h。 3、转染前可饥饿处理几小时，但是这样有细胞状态变差的风险，只适用于部分蛋白的转染。 悬浮细胞做实验通用密度：100万/ml 🌟悬浮细胞30～40%密度 同样适合慢病毒感染，悬浮细胞感染难度比贴壁大很多，且细胞没贴壁那么耐糙，因此感染时可以先测一个MOI和滴度再做❗️具体测定方法之前发过哦～ 🌟悬浮细胞90～100%密度 同样适合冻存、传代细胞，或动物实验 ✅悬浮细胞尽可能保证其密度足够的生长，不要频繁传代，可能影响细胞状态，因为有一部分悬浮细胞，稀疏长得很差，密度大反而越长越好，这是和贴壁不太一样的地方。 ✅细胞状态佳的话，可直接传代不用离心，除非培养基黄了再离心换液，直接把一皿的细胞1分为2，然后往2个皿中补新的培养基即可 |
回复此楼» 猜你喜欢
不应该看fileCode
已经有5人回复
-
2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B?
已经有7人回复
-
好奇怪的filecode
已经有6人回复
-
FileCode能看出啥？
已经有21人回复
-
长年满屏的广告，版主太不责任了。基金也等的急
已经有4人回复
-
filecode
已经有15人回复
-
关于Filecode分析方法
已经有4人回复
-
应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键
已经有35人回复
-
职称评审，求友友推荐见刊最快的期刊
已经有4人回复
-
奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样
已经有10人回复
