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ELISA与流式细胞术:全方位解读及应用指南
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什么是ELISA和流式细胞术? 首先,让我们先认识一下这两位"明星"的全名: ELISA全称是酶联免疫吸附测定法(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay),它是一种利用抗原-抗体特异性反应来检测样品中特定物质的方法。简单来说,它就像是用特制的"鱼钩"(抗体)去钓特定的"鱼"(抗原),然后通过酶的反应让我们知道钓到了多少"鱼"! 流式细胞术(Flow Cytometry)则是一种可以同时分析细胞多种特性的技术,它能对大量细胞进行单个分析,就像是给成千上万个细胞一个一个地拍"证件照",并且自动归类整理,告诉你每种细胞占多少比例,长什么样! ELISA的原理:分子界的"钓鱼高手" ELISA的工作原理就像一场精心策划的钓鱼活动~想象一下这个过程: 1️⃣ 铺鱼网":首先,我们在微孔板(就像一个有很多小格子的盘子)上铺上抗体或抗原,它们会牢牢地吸附在板子表面。这就像是在水里布下了特制的"钓鱼网",只会捕捉特定的"鱼"。 2️⃣ 捕获目标:当我们加入样本(比如血清)后,微孔板上的抗体会特异性地捕获样本中对应的抗原。这就像是鱼网只会捕获特定种类的鱼,其他鱼则自由游过。 3️⃣ 加入"标记员":接下来,我们会加入带有酶标记的抗体(就是那个能产生颜色反应的酶)。这些抗体会与已被捕获的抗原结合,形成"三明治"结构。这就像是给捕获的鱼贴上荧光标签,让它们变得容易被发现! 4️⃣ 显色反应:最后,我们加入酶的底物,酶会催化底物发生反应,产生有色物质。颜色越深,说明捕获的抗原越多!这就像是标记的鱼发光了,光越亮,说明捕获的鱼越多! 流式细胞术:细胞的"自动证件照系统" 流式细胞术则是一个超级智能的细胞分析系统,它的工作方式可以这样理解: 1️⃣ 细胞"化妆":首先,我们用荧光标记的抗体给细胞"化妆"。不同的抗体会识别并结合细胞上不同的蛋白质或其他分子,就像是给不同特征的细胞涂上不同颜色的荧光染料。 2️⃣ 排队"拍照":经过标记的细胞被吸入一个细管中,通过特殊设计,细胞会一个接一个地排成单行通过(这叫"流动系统")。就像是细胞在乖乖排队等待拍证件照一样! 3️⃣ 激光"闪光灯":当每个细胞通过激光束时,激光就像闪光灯一样"照亮"细胞。荧光染料被激发后会发出特定颜色的光。不同的荧光染料发出不同颜色的光,代表细胞的不同特征。 4️⃣ 自动"分类归档":计算机会记录每个细胞散射的光和发出的荧光信号,进行分析并绘制图表。这就像是计算机自动整理所有细胞的"照片",并根据它们的特征进行分类和统计。 毕合生物(www.bihebio.com)提供服务内容:分子生物学、免疫, 重组蛋白及ELISA相关、活性小分子化合物、高端化学、材料化学、细胞资源库与培养相关、生命科学、天然产物 |
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