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科研战神来了新虫 (小有名气)
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【模型攻略】揭秘多发性硬化的幕后推手！
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导语：你是否听说过“多发性硬化（Multiple sclerosis ，MS）”？这是一种被称为“不死癌症”的神经系统疾病，患者可能是突然视物模糊的年轻人，或是莫名行走困难的壮年。全球有数百万患者正与之抗争，但病因至今成谜。科学家们如何研究这种复杂的疾病？答案可能藏在一只小小的实验鼠身上。在所有为复制MS而开发的模型中，实验性自身免疫性脑脊髓炎 (EAE) 最能反映MS的自身免疫发病机制。通过一种名为EAE的模型，他们得以在实验室里“复现”这场疾病，并寻找攻克它的钥匙。今天，就让我们走进这场精彩的科学侦探故事。 实验性自身免疫性脑脊髓炎（Experimental autoimmune encephalomyelitis，EAE）作为多发性硬化（MS）的动物模型，其构建过程中实验动物的选择至关重要。不同的物种、品系、年龄和性别都会影响模型的成功率和实验结果的可重复性。以下从多个方面详细分析EAE模型的构建。PART 01物种/品系/试剂选择 物种选择EAE模型最常用的实验动物是啮齿类动物，尤其是大、小鼠。这类动物因其成本低、繁殖快、易于操作且免疫系统与人类有一定相似性，成为EAE研究的主流选择。此外，啮齿类动物的EAE模型能够较好地模拟MS的自身免疫病理特征，为研究MS的发病机制和药物筛选提供了重要平台。品系选择不同品系的动物对EAE的易感性存在显著差异。✔ C57BL/6小鼠：常用的EAE模型动物，因其对髓鞘少突胶质细胞糖蛋白（MOG35-55）诱导的EAE具有高度敏感性。✔ Lewis大鼠：常用的模型动物，尤其适用于研究维生素等营养物质对EAE的影响。✔ Wistar大鼠：因其稳定的免疫反应和易于操作的特点，常用于T细胞疫苗的研究。年龄和性别✔ 年龄：年轻动物（通常为6-8周龄）因其免疫系统较为活跃，更易诱导EAE模型。✔ 性别：性别差异在EAE模型中也有显著影响。例如，雌性动物在某些研究中表现出更高的发病率和更严重的症状，这可能与激素水平和免疫反应的性别差异有关。试剂选择✔ 抗原选择：常用的抗原包括髓鞘少突胶质细胞糖蛋白多肽（MOG35-55）、髓鞘蛋白脂质蛋白多肽（PLP）和髓鞘碱性蛋白（MBP）。其中，MOG35-55是C57BL/6J小鼠诱导EAE的常用抗原。✔ 佐剂：完全福氏佐剂（CFA）是EAE诱导中的常用佐剂，用于增强免疫反应。✔ 百日咳毒素（PTx）：用于增强EAE的诱导效果，但其剂量和批次效价需严格控制，以确保模型的一致性。 PART 02免疫操作 01抗原乳化将抗原（如MOG35-55）与CFA按比例混合，制备成乳剂。通常，抗原浓度为1-2 mg/mL，CFA与抗原的体积比为1:1。02免疫注射将乳化后的抗原注射到动物背部皮下或尾根部。通常采用多点注射，每点注射50-100 µL，总剂量为100-200 µg/只。03PTx注射在免疫当天和免疫后48小时，分别注射PTx（200-500 ng/只，腹腔注射）。PTx的剂量需根据批次效价调整，以确保模型的一致性。 PART 03模型评估 01临床评分从免疫后第7天开始，每天观察动物的临床症状，并按照标准评分系统进行评分。评分标准通常包括体重变化、尾部张力、后肢无力、前肢无力和瘫痪等。 02病理学检测在发病高峰期（通常为免疫后第16-20天）处死动物，取脑和脊髓组织进行病理学分析。常用染色方法包括H&E染色（观察炎症细胞浸润）和罗克沙尔坚牢蓝染色（观察脱髓鞘情况）。 03免疫学检测通过流式细胞术或ELISA检测外周血或中枢神经系统中的免疫细胞（如Th17细胞和Treg细胞）及其相关细胞因子（如IL-17和IL-10）。   |
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