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建议收藏！各类组织取材注意事项全攻略
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在动物实验中，组织取材是实验成功的关键第一步。不同组织的结构和特性各异，取材操作稍有不慎就可能影响后续实验结果。今天，我们就为大家详细梳理脑、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、肠道、生殖器官、骨组织、皮肤、肌肉、脊髓等各类组织的取材注意事项，助力你的实验顺利开展！ 一、脑组织处死小鼠后需尽快打开颅骨，操作时要小心，避免损伤脑组织。用小镊子和剪刀轻轻分离脑组织与颅骨，分离脑干、左右大脑半球时，切勿过度牵拉或挤压。 取材后立即放入预冷的固定液（如4%多聚甲醛）中，固定液用量为脑组织体积的10 - 20倍，以确保固定效果。 1、大脑：大鼠和小鼠整体取材，用纱布包裹固定；犬等较大动物在两大脑中央前后区、海马及基底结等处各取1块，大小为1.5cm×1.5cm×0.5cm。 2、小脑：经大脑横裂分离后取出，小动物整体取材并用纱布包裹固定；大动物取1块1.5cm×1.5cm×0.5cm的组织，需包括小脑中间部。 二、心脏组织胸腔剖开后直接切下心脏，操作时避免挤压心肌，防止组织损伤。打开胸腔时，注意保护心脏表面的血管和心包膜。 用镊子轻轻夹住心尖完整取出心脏，若需单独取材心房或心室，需准确切割，避免破坏心肌结构。 后续分析若为病理学检查，可采用合适固定液固定；若为分子生物学实验（如RNA提取），则迅速放入RNA保存液或液氮中冷冻保存。 三、肝脏组织暴露肝脏时，不要撕裂肝叶间的连接组织，用剪刀沿肝叶边缘准确剪下肝组织块，避免取到胆囊等周围组织。 肝脏富含酶类，取材后应尽快处理，固定液需及时渗透到组织内部，防止自溶。 在最大的肝叶各取1块包含包膜的组织，取材大小：小动物为1.0cm×1.0cm×0.5cm，大动物3.0cm×2.0cm×0.5cm；肝脏取材厚度不应超0.5cm，免疫组化用途取材为1.0cm×1.0cm×0.2cm。如有可视病灶，需包含病灶和临近正常组织，可先切取大块固定数小时至过夜，再修组织并换固定液继续固定；有胆囊的动物应取胆囊壁组织。 四、脾脏组织找到脾脏后，轻轻提起，用剪刀剪断周围系膜组织，完整取出脾脏。由于脾脏质地较脆，操作时要轻柔，避免挤压造成内部组织结构破坏。取材后可根据实验需求进行固定或冷冻保存。 五、肺脏组织打开胸腔后，小心分离肺脏与心脏、纵隔等周围组织。可取出整个肺脏，若只需部分肺叶，需准确切割，保持肺组织完整性，避免肺泡破裂。 肺组织含大量气体，放入固定液或保存液时，要确保其完全浸没，以保证固定或保存效果。 取两肺下叶和肺尖部组织各一块（包括胸膜），大小为1.5cm×1.5cm×0.5cm；若有病变，可根据病变大小与多少加取组织块。 六、肾脏组织打开腹腔后，小心分离肾周脂肪和结缔组织，避免损伤肾脏包膜。用镊子轻轻提起肾脏，剪断输尿管等连接组织，完整取出肾脏。若需区分皮质和髓质取材，需准确切割，取材后尽快处理。 左右肾脏各取1块，组织需包括皮质、髓质、肾乳头及被膜等各层结构，大小为1.5cm×1.5cm×0.5cm；膀胱取1块包含全层结构的组织，大小为1.5cm×1.5cm；若有可视病变，加取病变及周围组织。 七、肠道组织确定取材部位（如十二指肠、空肠、回肠或结肠）后，小心分离肠道与周围肠系膜组织。切断肠道时，切口要整齐，避免内容物泄漏污染组织；若需分析肠道内容物，要先收集内容物再取材。 肠道组织较薄且易变形，取材后应妥善固定或保存；研究肠道黏膜等特殊结构时，取材要尽量保持黏膜完整性。 分别在十二指肠逆行部和反迥部各取1块全层结构组织；小肠分别在空肠及回肠末端各取1块全层结构组织；大肠分别在结肠和直肠各取1块全层结构组织；所取材料尽量保持肉眼标本完整性，一般取长度为1~2cm。 八、生殖器官（睾丸、卵巢、子宫等）1、睾丸：分离阴囊皮肤后小心取出，避免损伤被膜和曲细精管结构。 2、卵巢：准确找到位置，小心分离周围脂肪和输卵管组织，完整取出。 生殖器官体积较小，可整体取材固定后，再分别取睾丸、附睾、前列腺（大动物）左外侧缘及中间部各一块。 3、子宫：子宫是中空脏器，宫颈易发病变，需取全层。子宫、宫颈（全层）及卵巢各取1块组织，大小为1.5cm×1.5cm×0.2cm。 九、骨组织可从四肢或脊柱处获取骨组织，使用专用钳子和锯进行取材，操作时佩戴手套以防感染。取材后应去除附着的肌肉和软组织，可直接冷冻保存或固定在乙醇等固定液中以备后续实验。 十、皮肤和皮下组织小鼠背部皮肤可作为取材区域，用剪刀或手术刀切下特定面积的皮肤。操作时保证器械无菌，避免皮肤外部微生物污染，皮下组织尽量与皮肤分开保存。 皮肤组织用于组织学观察和免疫组化时，建议立即放入固定液；若需RNA提取，直接冷冻保存。 十一、肌肉组织一般取四肢肌肉、腹部肌肉等，取材前用生理盐水冲洗表面，减少血液残留。操作时注意无菌，避免牵拉和挤压，确保组织完整。可根据需要选择立即冷冻保存或放入适当的固定液中。 十二、脊髓自颅底至底椎沿背部中线切开皮肤，剥离棘突与椎板上的骨膜、软组织等，在靠近棘突两旁向下用锯垂直锯开，动作小心，勿损伤脊髓；下端在荐椎和尾椎交界处横行锯开，用钳从上向下掀起已分离的棘突和椎板，暴露出硬脊膜，沿硬脊膜外切断各神经根，用镊子夹住硬脊膜向外轻拉，将硬脊膜和脊髓一起取出，然后沿脊髓前后正中线剪开硬脊膜，注入固定液。分别于颈、胸、腰髓阶段各取一段长0.5cm的组织。 以上就是各类组织取材的关键注意事项啦！实验操作中，大家务必根据组织特性和实验目的，严格遵循这些细节，才能为后续实验打下坚实基础。 |
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