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多肽切割步骤简易版
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核心原理
使用三氟乙酸 作为主酸，在搭配各种“清除剂”的混合液中，同时完成以下两件事：
1. 切断多肽与树脂之间的连接键。
2. 移除氨基酸侧链的保护基团。
最终得到粗品多肽。
关键步骤
1. 配制切割试剂
· 主剂： 三氟乙酸，占总体积的90%以上。
· 清除剂： 根据多肽序列添加，用于捕获强酸环境下产生的副产物，保护多肽。
· 水： 清除tBu等保护基产生的阳离子。
· 苯甲硫醚： 清除Pbf、Trt等保护基产生的阳离子。
· 乙二硫醇/三异丙基硅烷： 作为“清道夫”，防止烷基化等副反应。
· 苯酚： 防止精氨酸侧链发生副反应。
2. 选择配方（根据多肽序列）
· 标准配方（适用于不含Cys, Met, Trp的简单多肽）：
· TFA : 水 : 苯甲硫醚 : 乙二硫醇 = 92.5 : 2.5 : 2.5 : 2.5
· “难缠”序列配方（适用于含Cys, Met, Trp的多肽）：
· TFA : 水 : 苯甲硫醚 : 乙二硫醇 : 苯酚 = 90 : 2.5 : 2.5 : 2.5 : 2.5
· 作用：乙二硫醇和苯甲硫醚能有效防止半胱氨酸和甲硫氨酸被氧化。
3. 进行切割反应
· 将干燥的肽-树脂复合物浸泡在配制好的切割液中。
· 在室温下搅拌反应 2 - 4 小时。
4. 分离与沉淀
· 过滤： 反应完成后，过滤掉树脂，收集含有粗品多肽的TFA溶液。
· 沉淀： 将TFA溶液缓慢滴加到冰浴的冷乙醚中。
· 离心： 多肽会形成沉淀，通过离心收集。

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muchong8882楼
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tzynew6楼
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gordon39910楼
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