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liaoailing

银虫 (小有名气)

[交流] 【交流/求助】层析柱下端口总是排出气泡怎么办 已有2人参与

大家好!我用凝胶Sephadex G-75分离蛋白质,装柱前用洗脱液排除了层析柱下端胶管的气泡,但装柱后,打开恒流泵层析柱下端的胶管就不断的有气泡排出。这是怎么回事啊?有同学说是层析柱漏气,但我用脱脂棉塞了一下层析柱下端口还是有气泡排出。期待各位大虾的指导,我不停的装柱拆柱都一星期了。
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1949stone

荣誉版主 (知名作家)

海纳百川


liaoailing(金币+1):谢谢参与
柱子漏气了
海纳百川止于至善
2楼2009-11-10 17:31:22
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snoopyzxx

木虫 (著名写手)


liaoailing(金币+1):谢谢参与
楼主装柱前的填料时在酒精里吧?
是不是酒精和你加的底部的缓冲混合产生的气泡啊?
用20%酒精除底部的气泡试下。
生物资源交流QQ群:1044518333
3楼2009-11-10 17:49:08
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msw0103

金虫 (正式写手)


liaoailing(金币+1):谢谢参与
装柱之前
有没有往柱子底部先加一些平衡液,再倒入填料。
4楼2009-11-10 18:11:44
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yaojuan1631

金虫 (初入文坛)


liaoailing(金币+1):谢谢参与
先倒打一下,看上面入如果也是出气泡了,那就是柱子里有气泡了,不信你仔细观察一下柱子。。这样的话最好重装柱子,装柱子的时候要注意不要进气泡,平衡,上样,洗脱的时候也不要进气泡!
5楼2009-11-10 18:31:50
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liaoailing(金币+1):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by 1949stone at 2009-11-10 17:31:22:
柱子漏气了

6楼2010-04-05 14:20:33
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nnhc

木虫 (正式写手)


liaoailing(金币+1):谢谢参与
liaoailing(金币+5):我已经弄好了,是泵的转数太大了,流速太快了,填料也有点问题。O(∩_∩)O谢谢 2010-04-08 10:30
呵呵,这个现象我碰到过!
我想应该是这个原因:
    首先要确定你的层析柱上端是不漏气的;
    在这个基础之上用下面的方法解决,我想是因为你的柱子的液体流动的阻力比较大(是不是H/D太大了),料液难以流出;
    你的恒流泵的泵头的和输液管结合不紧密(泵头的卡子给输液管的压力不够),在开泵之后柱内由于阻力较大,柱内液体的流速小于泵的转速,会在柱内产生负压,而你的泵头又卡的不紧,就会不断有气泡产生。
7楼2010-04-07 16:58:22
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nnhc

木虫 (正式写手)

把泵头卡紧,注意泵头输液管的弹性(保证输液效果)。再不行就是你的分离体系内阻力太大。可以考虑换一个高径比,或者料液太粘,请自己判断后进行调整。
8楼2010-04-07 17:00:41
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