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细胞污染退退退！
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养细胞最怕啥？不是没结果，而是——一夜醒来，培养基成了“细菌汤”！ 污染现场“刑侦照片” 1️⃣ 细菌：24h内变黄+浑浊，镜下“细沙”游动 2️⃣ 真菌：3天漂浮“小霉岛”，菌丝像“树枝” 3️⃣ 霉菌：絮状+细丝，孢子随风飘，一台传全军 4️⃣ 支原体：0浑浊！只掉转染效率，Hoechst秒现荧光点 5️⃣ 黑胶虫：黑点布朗运动，抗生素=给它挠痒 6️⃣ 原虫：与细胞抢营养，核内空泡像“瑞士奶酪” 7️⃣ 非同种细胞：HeLa偷偷混入，STR一测直接“换爹” 抢救or丢弃？3秒决 细菌轻度→四环素50μg/mL冲击48h，重度→整盘丢！ 真菌/霉菌→直接丢+全面酒精+硫酸铜水盘，孢子杀不净！ 支原体→BM-Cyclin 14天套餐，PCR仍阳性？种子库重提！ 黑胶虫→高密度+专用清除剂，2代还乱爬？消毒桶伺候！ 一句话：普通细胞>2周抢救=浪费时间，立刻重种更香！ ️ 预防军规12条 ① 超净台内“手套+口罩+蝴蝶袖”，手臂绝不越线！ ② 枪头、试剂专细胞专用，贴色标+日期，杜绝HeLa“卧底”。 ③ 每月1次支原体PCR，季度STR“验明正身”，细胞也查身份证。 ④ 培养箱水盘每周换水+0.2%硫酸铜，真菌想长都难！ ⑤ 血清56℃30min灭活+0.1μm过滤，黑胶虫率↓80%。 ⑥ 新细胞隔离7天阴性再入库，防止“带病入职”。 ⑦ 不同细胞分盘操作，中间空1台超净台，避免交叉 splash。 ⑧ 操作完立刻75%酒精环形擦，擦到台面积液“吱吱”响。 ⑨ 培养基只预热到37℃，不反复水浴，减少营养降解。 ⑩ 实验记录写清批次+传代数+操作人，污染秒溯源。 ⑪ 实验室湿度<60%，空调滤芯季度换，霉菌孢子进不来。 ⑫ 组会前5min污染案例分享，把“倒霉经历”升级成全组财富！ 毕合生物(www.bihebio.com)提供服务内容：分子生物学、免疫, 重组蛋白及ELISA相关、活性小分子化合物、高端化学、材料化学、细胞资源库与培养相关、生命科学、天然产物 |
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