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二硫键反应条件
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二硫键反应条件选取 二硫键就是指蛋白质或 多肽分子结构中两个不同位点Cys的巯基(-SH)被氧化所产生的S-S共价键。一条多肽链上不一样的位置的氨基酸中间所产生的二硫键,能够把多肽链折叠成特定的空间分布。多肽分子一般来说分子量很大,空间分布繁琐,结构中产生二硫键时需要两个半胱氨酸在空间距离上非常接近。另外,多肽结构中还原态的巯基化学特性活跃,很容易出现其它的副作用,同时肽链上其余侧链也可能会出现许多修饰,所以,多肽链采取修饰所选择的氧化剂和氧化条件是反应的重要因素,反应原理也较为复杂,既有可能是自由基反应,也有可能是离子反应。反应条件有许多种选择,例如空气氧化,DMSO氧化等温和的氧化过程,或H2O2,I2,汞盐等剧烈的反应条件。 1、空气氧化法 空气氧化法生成二硫键是多肽合成中最具代表性的办法,一般是将巯基处在还原态的多1解于水里,在近中性或弱碱性环境下(PH值6.5-10),反应24个小时以上。为了降低分子相互间二硫键产生的可能性,这种方法往往需要在较低浓度的环境下完成。 2、碘氧化法 将多肽溶解于25%的甲醇水溶液或30%的醋酸水溶液中,逐滴滴加10-15mol/L的碘来进行氧化,反应15-40min。当多肽链里面含有对碘特别敏感的Tyr、Trp、Met和His的残基时,氧化条件要非常精准,氧化完成后,立即加入维生素C或硫代硫酸钠清除过多的碘。#多肽合成公司# |
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