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质谱也能“称体重”？3 分钟看懂信号强度 = 含量！
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质谱信号 = 样品量？三步流水线告诉你！ 1️⃣ 电离：EI/ESI/MALDI 都在动态范围里呈线性，样品越多，离子越多。 2️⃣ 传输：离子束太挤会互斥，离子阱记得开“智能进样”，别让空间电荷效应偷吃信号。 3️⃣ 检测：PMT 或 Orbitrap 的绝对强度与离子数线性相关，记得后台导出原始值，别只看百分比！ 两把“尺子”量天下：外标 VS 内标 外标法：配 5-6 个浓度梯度的标样 → 测峰⾯积 → 拟合⼯作曲线 → 读未知样。适合基质简单、批次少，但实验间误差⼤。 内标法：把“同位素标记”小哥哥直接加进样品，同次实验同个基质，系统误差瞬间抵消！重⾦属、代谢物、药物血药浓度统统一把抓。 同位素稀释 + SRM = 定量⻩⾦套餐 同位素内标：^13C、^15N 标记的分子，物理化学性质几乎⼀致，响应系数相同，m/z 差 3-6 Da，仪器轻松区分。天然同位素峰还能做“⽐值法”，再也不怕信号漂移！ 选择反应监测（SRM）：Q1 选母离子 → 碰撞室“剪”成特征子离子 → Q3 再选子离子。两步过滤，背景噪声↓ 检出限↓ 动态范围↑，复杂样品（血清、石油、环境水）定量⾸选！ 避坑 3 连 低温保存样品？记得把同位素内标⼀起冻，防⽌降解导致⽐值失真。 峰面积积分⽤平滑参数 3-5 点即可，过度平滑会把真峰当噪声砍掉。 同分异构体质量相同？升⾼分辨率（≥30,000 FWHM）或加离子淌度，别把丁酮当丁醛！ 小白上机模板（直接抄） 仪器：LC-QqQ 色谱：C18 2.1×50 mm，0.3 mL/min，梯度 5-95% B 6 min 离子源：ESI+，喷雾电压 3.5 kV，鞘气 35 arb SRM 对：母离子 285.1 → 子离子 193.1（待测），母离子 288.1 → 子离子 196.1（同位素内标） 定量：峰面积比 = A未知/A内标，代入标准曲线，10 秒出浓度！ 毕合生物(www.bihebio.com)提供服务内容：分子生物学、免疫, 重组蛋白及ELISA相关、活性小分子化合物、高端化学、材料化学、细胞资源库与培养相关、生命科学、天然产物 |
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