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Jiman_2025

铁虫 (初入文坛)

[交流] 慢病毒感染细胞后什么时候基因表达到达峰值? 已有1人参与

1.慢病毒表达时间较慢,一般代谢旺盛的细胞(如293T、BHK21等)48h后可以观察到GFP荧光(或者RFP红色荧光)

2.代谢比较缓慢的细胞(如原代培养细胞、神经干细胞、胚胎干细胞等)GFP(RFP)蛋白表达所需时间较长,感染后72-96h甚至更长时间可以观察到GFP(RFP)荧光

3.过表达慢病毒因载体中插入目的基因序列,可能荧光相比对照病毒稍弱

4.如载体中带有cas9/dcas9等较大蛋白,建议感染后7~10天再继续下游实验

感染后期请根据细胞生长的情况对细胞进行换液或传代,以保证良好的生长状态
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那株蓝莓不错

新虫 (小有名气)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
慢病毒感染后,GFP/RFP荧光表达峰值时间因细胞类型而异:
‌快速增殖细胞(如293T)‌:48小时左右可见荧光;
‌慢速增殖细胞(如原代细胞)‌:需72-96小时或更久;
‌过表达或大蛋白载体(如Cas9)‌:建议7-10天后进行下游实验。
2楼2025-09-15 16:56:06
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