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液相色谱仪故障大揭秘！漏液、漏气、气泡全搞定
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做实验的时候最怕遇到啥？当然是仪器故障啦！液相色谱仪那些常见的“小毛病”，还有超实用的解决方法，快拿小本本记好啦！ 01 漏液：全封闭体系的“小漏洞” 液相色谱仪从流动相瓶到废液瓶，本来是个滴水不漏的全封闭体系，可一旦漏液，那就是出故障啦！漏液的原因主要有两个，宝子们可得注意咯。 硬件接触不当 更换零件的时候，接头接口不匹配，就会漏液。不同公司的柱子接头千差万别，同一家公司不同时期的接头也大不一样。这时候，选用PEEK接头就很不错，通用性好，手拧就能保证不漏液。要是接口匹配，操作不当也会漏液哦！力度没把握好，拧得太紧或太松都不行；滑丝就更麻烦了，这可是动手能力弱的小伙伴常犯的错，不仅漏液，还可能报废重要部件。解决这个问题，只能多练练拧螺丝的基本功啦。 使用仪器不当 用缓冲液盐溶液作流动相，实验结束后不换甲醇水冲洗，流动相就会干燥形成晶体，导致漏液。不过，输送泵漏液不一定马上修，冲洗干净，以后多加小心就行。要是检测器漏液，那可就麻烦了，一般是吸收池的问题，更换费用很高。要是能凑合用，也不一定非得马上换哦。 02 漏气：气泡的“入侵” 漏液是内部向外漏，漏气则是外部气体跑进流路内部形成气泡。宝子们可得按流路方向逐个部件排查原因，解决方法也得对症下药。 过滤头 做油液实验时，流路管里有不规则但持续的小气泡，那得看看流动相有没有脱气。即使有真空脱气机，也得先超声脱气，这样能减轻脱气机的工作压力，还能提高工作效率。要是过滤头污染了，也会出现这种现象。处理方法很简单，拧下过滤头，在稀硝酸中浸泡，超声半小时，洗净后装回去就行啦。 透明流路管 这是过滤头和输送泵之间的那段管路，要是这里漏气，可不是有点气泡那么简单，整个管子可能全是空气，操作人员还不知道，输送泵白忙活半天，流动相瓶里的液体一点没少。这种情况对输送泵很危险，因为输液泵是输送液体，不是气体，里面的液体对活塞来说就像机油一样重要。要是活塞杆还残存缓冲盐，那就极易拉伤，造成不可逆转的影响。所以，预防为主很重要，液相色谱使用人员要相对固定，每台机每周至少开机一次，长期不用的话，每周也要冲流动相2小时。养成良好的工作习惯，才能避免这些问题。 要是流路管中漏气，可以用外力使管路充满液体。具体操作如下： 找到流路管进入输送泵的接头，拧下来。 用干净洗耳球的尖端对准管路的平整切口。 吸液体，看液面从流动相瓶里上升，离洗耳球5 cm左右时停止。 快速把接头拧回输送泵上（可能会有少许流动相外泄，这是正常现象）。 开机，打开排液阀门，启动输送泵。 等排液管中流出的溶液没有气泡时，再关闭排液阀，仪器就能正常工作啦。 03 输送泵和柱子：气泡的“小麻烦” 这些部位进了气泡，问题不大，冲掉就行啦。不过，宝子们还是要小心，别让气泡停留太久，影响实验结果哦。 04 检测器：气泡的“大麻烦” 整个流路中只要有一个气泡，检测器就会出现强烈的信号反映。检测器内部的气泡一般能被冲走，但也有很难冲掉的情况。要是检测器内有残留气泡，走基线时会时不时间隔出现直上直下的大信号峰。这时候，先试试普通流量能不能冲走，要是不行，那唯一的办法就是拆柱，把检测器直接连接到输送泵的出口，加大流量冲洗，肯定能把气泡冲走。 毕合生物(www.bihebio.com)提供服务内容：分子生物学、免疫, 重组蛋白及ELISA相关、活性小分子化合物、高端化学、材料化学、细胞资源库与培养相关、生命科学、天然产物 |
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