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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 如何在大肠杆菌中做组成型表达？
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huainianshili

金虫 (正式写手)

[交流] 如何在大肠杆菌中做组成型表达？

有没有可以做组成型表达的质粒？
网上说pmal可以但是我下了说明书，上面说要用iptg诱导。哎。
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向光电总机及其全家及其全家的祖宗八代致以崇高的敬意
1楼 2009-11-09 22:16:10
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quiller2000

木虫 (著名写手)
不知道你是什么意思
可能你需要一个和大肠杆菌基因组的拷贝数差不多的质粒，然后你的基因的启动子也是和大肠杆菌的看家基因差不多才行
为什么不整合到染色体上呢
呵呵
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致良知
2楼2009-11-09 22:26:28
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huainianshili

金虫 (正式写手)
没那么复杂，我只是想组成型表达一个外源酶。诱导表达已经做过了，酶活很富余。所以表达量中等以上就行。整合到染色体上我觉得太麻烦。
引用回帖:
Originally posted by quiller2000 at 2009-11-9 22:26:
不知道你是什么意思
可能你需要一个和大肠杆菌基因组的拷贝数差不多的质粒，然后你的基因的启动子也是和大肠杆菌的看家基因差不多才行
为什么不整合到染色体上呢
呵呵

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向光电总机及其全家及其全家的祖宗八代致以崇高的敬意
3楼2009-11-09 23:50:24
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scelab

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫之有关部门负责人
引用回帖:
Originally posted by huainianshili at 2009-11-9 23:50:
没那么复杂，我只是想组成型表达一个外源酶。诱导表达已经做过了，酶活很富余。所以表达量中等以上就行。整合到染色体上我觉得太麻烦。

一周完成，主要在设计
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小木虫之有关部门负责人
4楼2009-11-10 00:19:49
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huainianshili

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by scelab at 2009-11-10 00:19:

一周完成，主要在设计

用什么技术？ red重组？ 还有我往哪插呀？是用染色体上的启动子还是自己先构建启动子？
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向光电总机及其全家及其全家的祖宗八代致以崇高的敬意
5楼2009-11-10 00:23:30
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