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1073268128新虫 (小有名气)
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一般来说，先将粉末用超纯水或者稀醋酸（0.1%）将多肽溶解到一个超高浓度下作为储存溶液，而不是直接配置到检测浓度。等需要用的时候再把这个储备溶液用缓冲Buffer配置到需要浓度。不能直接用Buffer缓冲液来溶解多肽，因为很多肽在高盐浓度下溶解度是下降的，如果出现不溶情况，去除这些盐和有机试剂是很困难的一件事。如果多肽溶解过程中出现可见颗粒始终无法分散到水相中，可以用超声的助溶，但不能起到改善溶解性的效果。 其次，溶解前先审视一下多肽序列，如果多肽中氨基酸（Ala,Phe,Ile,Leu,Met,Pro,Val,Trp,Tyr,Cys）占比高，基本上这条肽比较难溶的。另外还要计算序列中含有多少正价基团（Lys,Arg,His和N端）和负价基团（Asp,Glu和C端），在中性条件下，最后的净价是正是负？价态为正，在溶解时用稀醋酸调节pH到酸性，价态为负，溶解时可以用稀氨水调节pH到碱性。 如果序列中任何pH下基本不带电荷，或者序列中疏水性氨基酸个数超过50%，可以考虑加入少量乙腈，乙醇，DMSO来溶解。如果已知一条肽在水相中溶解不是很好，而最终使用必须在水相，可以考虑全部使用醋酸或者DMF,DMSO溶解，然后缓慢加水稀释，这样有机溶剂有助于多肽分散到水相中。 发自小木虫IOS客户端 |
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