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毕合生物2024

铜虫 (正式写手)

[交流] 微生物菌种保藏与活化攻略

1️⃣ 保藏方法大揭秘

传代培养保藏法:这是最简单的短期保藏方法,就像把细菌们放在“小旅馆”里,定期给它们“换房间”。把菌种接种在固体斜面培养基上,放在4℃冰箱里保存。不过,这种方法保藏时间短,细菌们容易“闹脾气”发生变异,而且“小旅馆”还容易被“不速之客”污染。像普通细菌只能保存1个月左右,假单胞菌2周就得“换房间”一次。

液体石蜡覆盖保藏法:这种方法就像是给细菌们穿上了一层“雨衣”,隔绝空气,防止水分蒸发。把液体石蜡注入斜面培养物中,让细菌们在“雨衣”保护下安静地“睡觉”,保藏时间可以延长到1-2年,霉菌、放线菌、芽孢细菌甚至能睡2年以上呢!

载体保藏法:想象一下,细菌们坐在“小沙发”上,然后被风干。把细菌们吸附在土壤、沙子、硅胶、滤纸等“小沙发”上,再进行干燥保藏。这种方法适合那些会产芽孢或孢子的“小顽皮”,保藏时间可达2年。

冷冻保藏法:这是利用低温让细菌们的“新陈代谢”慢下来,就像把它们放进“冰箱”里。有-20℃冰箱保存、-80℃冰箱保存和液氮保存(-196℃)几种方式。甘油管冷冻保藏法是把菌种悬浮在甘油保护剂中,然后放进“冰箱”,保藏时间可达数年,适合大多数微生物。

冷冻干燥保藏法:这种方法是先把细菌们在极低温度下快速冷冻,然后在减压下把水分“赶跑”,就像给细菌们做了一个“真空包装”。

液氮超低温保藏法:这是最“豪华”的保藏方式,把菌种悬浮在保护剂中,放进-196℃的液氮里。这种方法保藏时间最长,适合大多数微生物。

2️⃣ 活化方法速速学

传代培养保藏法的活化:直接从斜面培养基上挑取少量菌体,转接到新鲜的斜面培养基上,就像给细菌们换了个“新家”。通常需要连续传代2-3次,细菌们就能恢复活力啦。

液体石蜡覆盖保藏法的活化:挑取少量菌体转接到适宜的新鲜培养基上,生长繁殖后再重新转接一次,细菌们就能“满血复活”啦。

载体保藏法的活化:从载体中取出少量菌体,转接到适宜的培养基上进行培养。比如沙土管保藏的菌种,取部分沙土粒于适宜的斜面培养基上,长出菌落后再转接一次。

冷冻保藏法的活化:把冻存管从冰箱或液氮罐中取出,立即放入38℃-40℃的水浴中快速复苏并适当摇动,直到内部结冰全部溶解为止。然后把内容物移至适宜的培养基上进行培养。

冷冻干燥保藏法的活化:先用75%酒精擦拭安瓿上部,把安瓿管顶部烧热,用冷水使其破裂。然后用无菌水或培养液溶解菌块,移入新鲜培养基中进行适温培养。

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