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试剂配错全白做!零翻车秘籍
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辛辛苦苦养细胞,结果因为一瓶PBS配错浓度,实验直接重开!从称量到定容全程高能! Step1 实验前灵魂三问 你要配啥? 浓度算对了吗?别手抖多写一个0! 试剂过期没? 易潮解的NaOH结块=浓度直接漂移 工具干净吗? 天平托盘残留上一瓶试剂=灾难现场 Step2 称量像拆盲盒 固体试剂用称量纸or小烧杯,易吸湿的NaOH、CaCl₂建议现取现称 液体用量筒or移液枪,视线与凹液面最低点平齐,读数时屏住呼吸避免手抖! 称量完立刻盖紧试剂瓶盖,防止“空气偷走”你的纯度~ Step3 溶解有节奏 难溶固体先加少量溶剂润湿成糊状再补满,Na₂HPO₄直接加整瓶水会结块到怀疑人生! 有机试剂用玻璃棒引流,DMF、DMSO这些“皮肤刺客”记得戴双层手套 热敏感试剂(如酶类)用冰浴+磁力搅拌,温度超过25℃活性直接腰斩 Step4 定容仪式感拉满 容量瓶使用法则:先加2/3溶剂→摇匀→补液至刻度线→倒转摇匀10次→静置观察是否挂壁 缓冲液校准:pH计用标准液三点校准后再测,调pH时NaOH/HCl要逐滴加,每滴间隔5秒 易挥发试剂:定容后立刻盖紧塞子,贴标签时顺便写上开封日期,防止“挥发魔法” Step5 标签是救命符 手写标签防水笔+透明胶带双重保险,内容必须包含:试剂名称、浓度、配制人、日期、储存条件 血泪教训:曾经有人把10%SDS写成1%,结果跑胶时蛋白直接原地解散 彩蛋:特殊试剂隐藏关卡 SDS-PAGE胶:APS现配现用,TEMED用棕色瓶避光,过期TEMED会让胶不凝固 细胞培养液:血清解冻后轻柔颠倒混匀,避免剧烈摇晃产生泡沫影响细胞生长 荧光染料:FITC、Rhodamine这类见光死选手,全程避光操作+锡纸包裹保存 翻车现场急救包 浓度配高了? 用溶剂稀释后重新定容,千万别直接倒掉 pH偏酸/碱? 用弱酸弱碱微调,强酸强碱容易破坏缓冲体系 试剂变色? 立即停用!可能是污染或分解,重新配制才是正道 毕合生物提供服务内容:分子生物学、免疫, 重组蛋白及ELISA相关、活性小分子化合物、高端化学、材料化学、细胞资源库与培养相关、生命科学、天然产物 |
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