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铜虫 (小有名气)

[交流] 🌟细胞培养污染,这些坑千万别踩!🧼

🎯细胞污染的常见类型

1️⃣细菌污染

细菌污染是细胞培养中最常见的污染类型之一。细菌种类繁多,常见的有革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。革兰氏阴性菌污染时,培养液通常会变浑浊,并且颜色可能会变黄。显微镜下可以观察到大量的细菌在细胞周围游动。细菌会与培养的细胞争夺氧气和营养物质,还会释放毒素干扰细胞的正常生长代谢,导致细胞生长缓慢甚至死亡。

2️⃣真菌污染

真菌污染也是细胞培养中常见的污染类型。真菌污染时,培养液表面会出现一些丝状或绒毛状的菌落,它们的生长速度相对较慢,但一旦污染,很难清除。真菌的菌丝可能会穿透细胞膜,进入细胞内部,引起细胞结构的破坏,使细胞失去正常的形态和功能。

3️⃣支原体污染

支原体污染是最难以察觉的一种污染,因为支原体体积微小,一般光学显微镜下难以观察到。它会吸附在细胞表面或者侵入细胞内部,干扰细胞的代谢过程,如影响细胞的蛋白质合成、核酸代谢等。支原体污染可能会持续很长时间而不被发现,导致实验结果出现偏差。

4️⃣黑胶虫污染

黑胶虫污染是一种较为少见但危害较大的污染类型。黑胶虫是一种小型的节肢动物,它们可以在培养液中生存和繁殖,会在培养液中形成黑色的团块。黑胶虫会消耗培养液中的营养物质,影响细胞的生长环境,导致细胞生长缓慢甚至死亡

预防细胞污染的黄金法则

1️⃣严格遵守无菌操作原则

在超净工作台内进行细胞操作,确保工作台的高效过滤器正常工作,定期更换和清洁过滤器。在操作前,使用紫外线灯对工作台进行消毒,通常照射30分钟以上。

2️⃣严格把控试剂和耗材的质量

选择高质量、无污染的培养基和血清。购买时,选择信誉良好的供应商,并检查产品的生产日期和保质期。使用前,对培养基进行灭菌处理,通常采用高压蒸汽灭菌。血清则需要经过过滤除菌,使用0.22μm的滤膜进行过滤,以去除可能存在的微生物。

3️⃣定期对实验室环境和设备进行消毒

定期对实验室进行清洁和消毒,包括地面、墙壁、实验台面等。使用消毒剂进行擦拭,如70%的酒精或含氯消毒剂。定期更换实验室内的空气过滤器,保持实验室内的空气质量。

4️⃣建立良好的细胞培养操作规范

在进行细胞操作时,应严格按照标准操作规程进行。

5️⃣定期检测细胞污染情况

定期对细胞进行污染检测,如细菌、真菌、支原体等污染的检测。可以使用显微镜观察细胞的形态和生长情况,也可以使用一些专门的试剂盒进行检测。

毕合生物提供服务内容:分子生物学、免疫, 重组蛋白及ELISA相关、活性小分子化合物、高端化学、材料化学、细胞资源库与培养相关、生命科学、天然产物
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