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小鼠解剖&取血清｜血泪教训总结
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一、解剖前准备：细节决定成败 ?器材消毒要彻底：镊子、剪刀等工具若消毒不彻底比如只用酒精擦拭却没灼烧，可能污染样本，之前有次没烧镊子，结果血清检测时出现细菌污染，实验直接报废 ?小鼠禁食需注意：取血前建议禁食12小时，但别禁水曾有回忘禁水，小鼠脱水导致血液黏稠，心脏取血时血流不畅，血清量少了一半 ?固定姿势别马虎：仰卧固定时四肢一定要绑牢，试过只绑前肢，小鼠挣扎时踢到操作台，不仅取血失败，还差点让小鼠受伤 二、取血清关键步骤：手稳+时机把控 ?取血部位选对吗 ?眼眶后静脉丛取血：新手慎选！角度没找对太靠内，曾戳到小鼠眼球，不仅出血少，还影响后续实验伦理审查 ?心脏取血：一定要等小鼠深度麻醉捏脚趾没反应，再操作有次麻醉浅了，小鼠突然抽搐，针头戳偏，心脏破了血都流到胸腔里，血清根本没法收集 ?血清分离时机：采血后别直接离心！先让血液在室温凝固30分钟用牙签轻轻划开血凝块更好，试过刚采血就离心血清里全是纤维蛋白，离心后上层都是絮状物，检测数据全错 三、常见翻车现场：这些错误别再犯 ?溶血毁所有 ?采血时针头反复穿刺血管如心脏取血扎了两次，红细胞破裂导致血清呈粉红色，测生化指标时谷丙转氨酶数值直接飙高，数据全废 ?离心速度太高，超过3000转/分或离心管没平衡，曾有次离心后血清分层不清下层全是红细胞碎片，只能重取 ?样本混淆灾难：同时做多个小鼠实验时，一定要用不同颜色标签纸标记，如1号鼠红色、2号鼠蓝色，有回忘贴标签最后分不清哪管血清对应哪只鼠，实验重做不说小鼠也遭罪 四、伦理与安全：别忽视的细节 ?处死方式合规性：颈椎脱臼法要确保一次成功，新手操作不熟练时（比如力度不够）小鼠会持续挣扎，不仅违反动物伦理，还可能导致取血时应激激素升高，影响血清激素水平检测结果 ?生物安全防护：血清样本若不慎溅到手套上，别直接用手擦脸！曾有同事没注意，摘手套时蹭到眼皮，虽然小鼠健康，但事后想起来还是后怕，一定要及时用碘伏消毒 五、高效技巧：老司机私藏经验 ?取血前用37℃暖灯照小鼠腹部1分钟，血管会更充盈，心脏取血时进针后能看到明显回血，成功率翻倍 ?血清分装时用带滤芯的吸头，避免吸取底层细胞碎片，分装后立即冻在-80℃，别反复冻融（试过冻融3次，ELISA检测时背景值高到无法分析） 做好这些细节，既能提高实验成功率，也能减少小鼠痛苦你在操作中遇到过哪些难题？可以聊聊，帮你分析怎么破局！ 发自小木虫IOS客户端 |
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