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毕合生物2024

铜虫 (小有名气)

[交流] 细胞培养基颜色变来变去?别慌,这里有答案

培养基颜色为啥会变

1️⃣酚红这个“变色龙”

酚红是培养基里的 pH 指示剂,可太神奇啦!它就像个“变色龙”,在 pH 值 6-8 的范围内,颜色会从黄变紫红。正常情况下,培养基 pH 值中性时,它是红色的。要是细胞代谢旺盛,产生酸性物质,培养基就偏酸,酚红就变黄啦。相反,要是 CO₂ 浓度不足,培养基偏碱,酚红就变紫。

2️⃣细菌“捣乱”

细菌或真菌要是跑进培养基里,可就麻烦啦!它们会快速繁殖,改变培养基的化学环境,让 pH 值下降,颜色变黄或浑浊。这不仅影响细胞生长,还会破坏实验结果,所以无菌操作可太重要啦!

3️⃣储存条件“惹祸”

培养基要是长期暴露在高温、强光下,或者密封不严,里面的成分就会分解或氧化,颜色也会变。开封后的培养基,里面的二氧化碳会跑掉,导致 pH 值偏碱,颜色变深。建议配好培养基后,分装到小离心管里,一周内用完,这样保存效果最好。

4️⃣成分不同颜色也不同

不同成分的培养基颜色本来就不一样。比如 DMEM 培养基比 1640 培养基颜色深,主要是因为 DMEM 里面的酚红含量多。还有些培养基不含酚红,就呈现无色或者淡黄色。


培养基颜色变化对细胞的影响

1️⃣细胞代谢“乱套”

细胞内的代谢过程需要在特定的 pH 范围内进行,最适 pH 值在 7.2-7.4 之间。要是 pH 值过高或过低,细胞内的酶活性就会受影响,代谢反应也乱套啦。比如,酸碱平衡被破坏,细胞的能量供应方式就会受影响,细胞的正常生理功能也会出问题。

2️⃣细胞生长“受阻”

适宜的 pH 值能保证细胞正常生长,大多数哺乳动物细胞在 pH 值 7.2-7.4 的环境中生长最佳。要是 pH 值偏离这个范围,细胞生长速率就会减慢。比如,在 pH 值 6.70 的条件下,细胞生长缓慢;而在 pH 值 6.80-6.90 条件下活细胞密度最高,超出这个范围活细胞密度就会降低。

3️⃣细胞形态与分化“异常”

特定的 pH 值范围对于维持细胞形态和诱导细胞分化至关重要。要是 pH 值偏离适宜范围,细胞形态就会异常,甚至影响细胞向特定方向的分化能力。

4️⃣细胞信号传导“卡壳”

pH 值的变化会影响细胞间的信号传导过程。细胞间的信号传导是物质分子之间的相互作用,经由细胞表面的受体和蛋白质,向细胞内外传递信息。要是 pH 值不合适,这个过程就会“卡壳”,影响细胞的正常功能。

5️⃣细胞生存能力“下降”

偏差很大的 pH 值环境会对细胞膜造成损伤,影响细胞膜的通透性和稳定性,从而增加细胞死亡率,降低培养效率。


小贴士

定期观察:养成每天观察细胞和培养基颜色的习惯,一旦发现颜色异常,及时处理。

无菌操作:严格遵守无菌操作规范,防止细菌和真菌污染。

正确保存:培养基要密封保存在 4℃冰箱里,避免高温、强光和密封不严。

及时更换:培养基颜色变黄或变紫时,要及时更换新鲜培养基,维持细胞生长的最佳环境。

毕合生物提供服务内容:分子生物学、免疫, 重组蛋白及ELISA相关、活性小分子化合物、高端化学、材料化学、细胞资源库与培养相关、生命科学、天然产物
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