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铜虫 (小有名气)

[交流] 🌟细胞也会“窒息”?培养基深度的秘密✨

细胞培养里那些容易被忽视的小细节,比如培养基深度对细胞的影响。你有没有想过,细胞也会“窒息”呢?快来看看这篇超实用的攻略吧!


细胞“窒息”的真相

在哺乳动物体内,氧气从毛细血管扩散到细胞的距离非常短,一般不超过100μm。但在体外培养系统中,细胞获取氧气就难多了。氧气必须从培养基表面扩散到底部才能到达细胞,这个距离就是培养基深度,通常为几毫米——距离是体内的数十倍。

氧气在液体中的扩散遵循菲克第一定律,简单来说就是:扩散速率和粒子浓度梯度成正比,和扩散距离成反比。所以,想提升扩散速率,要么增加培养基上方的氧气浓度,要么降低培养基的高度。


如何优化培养条件

1️⃣降低培养基体积

降低培养基体积可以显著改善细胞周围的氧气浓度。例如,将培养基体积从1mL减少到0.5mL,可以显著提高细胞周围的氧气浓度,减少细胞的缺氧状态。

2️⃣优化培养基深度

优化培养基深度,使其更接近体内水平。例如,将培养基深度从2.4mm减少到1.2mm,可以显著提高氧气扩散速率,减少细胞的缺氧状态。

3️⃣增加氧气浓度

增加培养基上方的氧气浓度,例如使用高氧培养箱或增加培养箱内的氧气浓度,可以显著提高细胞周围的氧气浓度。

4️⃣定期更换培养基

定期更换培养基可以确保细胞周围的氧气浓度和营养成分充足。建议每2-3天更换一次培养基,确保细胞处于最佳生长状态。


小贴士

无菌操作:所有操作都要求无菌,防止杂菌污染。

标记培养皿:标记好时间、细胞类型、培养条件等,方便后续观察和记录。

观察细胞状态:定期观察细胞的生长状态,确保细胞处于良好的生长环境中。

毕合生物提供服务内容:分子生物学、免疫, 重组蛋白及ELISA相关、活性小分子化合物、高端化学、材料化学、细胞资源库与培养相关、生命科学、天然产物
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