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夏末～易科

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CCK8细胞增殖曲线绘制
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CCK8细胞增殖曲线绘制
CCK8??是细胞增殖表型hin重要的一个实验[赞R]
原理：WST-8（四唑盐）是 CCK-8 的主要成分，呈粉色[红色心形R]。在电子载体（1-Methoxy PMS）的作用下被线粒体中的脱氢酶还原为黄色[黄色心形R]甲臜类染料（Formazan），并释放到细胞外溶解在培养基中，生成的甲臜物的数量与活细胞的数量成正比。用酶联免疫检测仪在 450nm 波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量
注意事项??：
1??细胞要充分消化，而且一定要铺匀，还不能过密，一般3000个细胞/孔，不同细胞还需要调整
2??关于CCK8孵育1-4h，具体时间可以做预实验摸索，得到CCK8最佳反应时间
3??CCK8最好配成10%稀释液（用完全培养基稀释）加到细胞中
4??最好用双波长检测，检测波长450nm，参比波长600nm，参比波长可以过滤掉因为液体浑浊，孔板底部不干净带来的测量误差（OD450-OD600即可，但是我比较懒，没测参比波长[偷笑R]）
5??每天定点测量，孵育CCK8的时间也都保持一致
6??其实96孔板不太容易污染，可以直接用培养细胞的96孔板进行测定，尽快测定，测完盖上盖子放回即可，但是我们酶标仪距离培养室有一定距离，所以我会把上清吸到新的96孔板中（洗一洗晾干下次接着用它测）

CCK8细胞增殖曲线绘制

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1楼 2025-06-09 15:21:55
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tzynew2楼
2025-06-09 15:23   回复  
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muchong8883楼
2025-06-09 15:23   回复  
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XG-WUST4楼
2025-06-09 15:36   回复  
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学员j30oDr5楼
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leafmavis6楼
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jinchengzi7楼
2025-06-09 15:48   回复  
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坩埚供应商8楼
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wzh-20109楼
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yandz68071710楼
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郭大锤11楼
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MethanolD12楼
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gordon39913楼
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bodygb14楼
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nono200915楼
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麦兜121216楼
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三磷酸-腺苷17楼
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330845937318楼
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bjdxyxy19楼
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兔托尔列夫斯基20楼
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哈姆太郎21楼
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weizhe3422楼
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zy51702551223楼
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wyj97024楼
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15923647825楼
2025-06-10 07:24   回复  
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三分之二12326楼
2025-06-10 09:51   回复  
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