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毕合生物2024

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[交流] 平板倒置放？涂布有讲究！微生物实验超实用技巧已有1人参与

微生物实验，平板倒置放和涂布操作是不是让你很困惑？今天就来给大家唠唠，为啥平板要倒置放，还有涂布的正确姿势，赶紧搬好小板凳，认真听讲啦！

平板为啥要倒置放？

1️⃣ 防止水分凝结污染

倒置放置可以有效防止水分的凝结与污染。冷凝水滴落到培养基中会引起微生物的交叉污染，而倒置放置就能避免这个问题。

2️⃣ 保持培养基湿度

倒置操作有利于保持培养基的湿度。通过微小的底部凸起形成的缝隙，使水分能够适度挥发，减少培养基水分的蒸发速度。

3️⃣ 维持气体交换

倒置培养有助于维持微生物的正常气体交换，使微生物在稳定的环境下进行呼吸作用和生长，有利于保持菌落的形态及生长特征。

4️⃣ 降低杂菌污染风险

倒置还能有效降低外界杂菌污染的风险，保持培养环境的纯净度。

5️⃣ 便于观察和计数菌落

倒置平板有助于观察和计数菌落，使菌落生长集中于表面，便于观察和计数工作的进行。

平板涂布的正确姿势

1️⃣ 准备工作要做好

无菌操作：确保操作环境处于无菌状态，包括对无菌室进行紫外线消毒、操作者衣着和手部消毒以及无菌操作工具的灭菌处理等。

涂布器消毒：涂布器需在含酒精的烧杯中消毒。

平板干燥：预制的平板需在超净工作台中充分干燥，避免涂布过程中水分过多导致菌落不规则蔓延。

2️⃣ 涂布操作要规范

吸取菌液：适量吸取菌液滴于培养基表面，每皿加样量建议为0.1mL-0.2mL。

均匀涂布：使用消毒过的涂布棒均匀涂布菌液，并注意避免涂布至平皿边缘。

力度适中：涂布时力度要适中，避免划破培养基表面。

静置渗透：涂布结束后需对涂布棒进行灭菌处理，并将平板静置10分钟促使菌液渗透入培养基内。

3️⃣ 培养条件要合适

倒置培养：将涂布好的平板倒置放入恒温培养箱中，设置适当的温度和湿度条件进行培养。

培养时间：培养时间根据微生物的种类和生长特性而定，一般需要24~48小时。

注意事项不能忘

1️⃣ 无菌操作

整个过程需要在无菌环境下进行，避免微生物污染。

2️⃣ 固体培养基要摇动

固体培养基放置在水浴锅中，也要经常摇动，不能静置。

3️⃣ 处理多余水分

如果发现平板上水太多，处理后再使用。

4️⃣ 标记要清晰

切记写清楚标记，方便后续观察和记录。

5️⃣ 涂布器要灭菌

试验完毕，注意灼烧涂布器，以免影响环境，造成交叉污染。

毕合生物提供服务内容：分子生物学、免疫, 重组蛋白及ELISA相关、活性小分子化合物、高端化学、材料化学、细胞资源库与培养相关、生命科学、天然产物

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