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铜虫 (小有名气)

[交流] 细胞污染了,还能救回来吗?救命指南来啦!

做细胞实验最怕的就是污染!细胞污染不仅影响实验结果,还可能让你前功尽弃。今天就来给大家讲讲,细胞污染了到底还能不能救,怎么救!

细胞污染的“真凶”是谁?

细胞污染主要有四大“真凶”:细菌、真菌、支原体和黑胶虫。

1️⃣ 细菌污染

细菌污染最明显,培养液会变黄、浑浊,显微镜下还能看到细菌。这通常是操作不规范导致的,比如没戴手套、没用酒精灯消毒。

2️⃣ 真菌污染

真菌污染也不少见,培养液里会出现淡黄色或白色的漂浮物,显微镜下能看到菌丝。这大多是空气中的孢子飘进来的。

3️⃣ 支原体污染

支原体污染最“狡猾”,细胞生长变慢,边界模糊,但培养基看起来没啥变化。而且支原体很小,光学显微镜都很难看到。

4️⃣ 黑胶虫污染

黑胶虫污染也很烦人,培养基看起来正常,但显微镜下能看到黑色小点,这些点还会动。抗生素对它没用。

细胞污染了,怎么救?

1️⃣ 细菌和真菌污染

轻度污染:用PBS溶液清洗,再用高浓度抗生素处理,比如青霉素-链霉素或庆大霉素。

严重污染:建议直接丢弃,别心疼,不然污染会扩散。

预防为主:严格遵守无菌操作,操作前洗手、戴手套、用酒精灯消毒,操作时动作轻柔,避免剧烈晃动培养瓶。

2️⃣ 支原体污染

使用支原体清除试剂:比如Mycoplasma Remover Reagent,25 µg/ml浓度处理2-3周。

环丙沙星注射液:20 µg/mL培养2代,然后10 µg/mL持续2周。

细胞状态差:建议直接丢弃,别冒险。

3️⃣ 黑胶虫污染

使用黑胶虫清除剂:确保血清无污染,增加细胞密度,培养2-3代。

状态不佳:消毒后丢弃,别犹豫。

预防污染,才是王道!

预防污染,比处理污染更重要!以下是一些预防小贴士:

使用高品质血清:血清质量差,容易带入污染。

定期更换培养基:别让培养基过期,过期的培养基容易滋生细菌。

定期检查细胞状态:发现异常,及时处理。

保持实验室清洁:定期消毒,保持实验室通风良好。

细胞污染虽然可怕,但只要及时发现、正确处理,还是有机会救回来的。下次遇到细胞污染,别慌,按照这些方法来,说不定就能“起死回生”!

毕合生物提供服务内容:分子生物学、免疫, 重组蛋白及ELISA相关、活性小分子化合物、高端化学、材料化学、细胞资源库与培养相关、生命科学、天然产物
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