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铜虫 (小有名气)

[交流] 细胞培养中的“小黑点”?别慌,这里有解决办法!

做细胞培养的时候,是不是经常遇到培养基里出现“小黑点”的情况?今天就来给大家唠唠这些“小黑点”到底是个啥,以及怎么处理它们!

一、“小黑点”是个啥?

细胞培养中出现的“小黑点”,可能是以下几种情况:

细菌污染如果细胞被细菌污染,培养基会变浑浊、变黄,细胞状态会明显变差。在显微镜下,黑点会游动或翻滚,这和布朗运动不一样。

细胞残骸细胞老化后,可能会出现破碎的细胞残骸,看起来像是“小黑点”。

血清沉淀血清经过反复冻融后,会产生沉淀,看起来像是“小黑点”。如果血清经过热灭活,沉淀物会更多。

培养基pH值问题如果培养基的pH值偏高,细胞生长环境不好,也可能出现“小黑点”。

原代细胞中的杂质如果是培养原代细胞,出现的“小黑点”可能是原代组织中的杂质,多次传代可以消除。

二、怎么处理“小黑点”?

确认是否为细菌污染

观察培养基是否变浑浊、变黄。

细胞状态是否明显变差。

显微镜下观察黑点是否游动或翻滚。

如果是细菌污染,建议使用消毒剂处理后直接丢弃;如果细胞比较珍贵,可以用5-10倍的抗生素冲洗24-48小时,再换成常规培养基。

细胞残骸

离心300-500rpm,3分钟,分离完整细胞和碎片。

掌握细胞传代的最佳时机,减少血清冻融次数。

血清沉淀

尽量减少血清冻融次数。

如果血清经过热灭活,沉淀物会更多,建议不进行热灭活操作。

培养基pH值问题

将培养基配制成适宜细胞生长的pH值。

原代细胞中的杂质

如果是原代细胞,多次传代可以消除杂质。

三、总结:细胞培养中的“小黑点”,别慌!

细胞培养中出现“小黑点”虽然让人头疼,但只要找到原因,就能轻松解决!确认是否为细菌污染,如果是,及时处理;如果不是,根据具体情况采取相应措施。只要注意这些细节,细胞就能健康生长!

毕合生物提供服务内容:分子生物学、免疫, 重组蛋白及ELISA相关、活性小分子化合物、高端化学、材料化学、细胞资源库与培养相关、生命科学、天然产物
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