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细胞培养中的“小黑点”?别慌,这里有解决办法!
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做细胞培养的时候,是不是经常遇到培养基里出现“小黑点”的情况?今天就来给大家唠唠这些“小黑点”到底是个啥,以及怎么处理它们! 一、“小黑点”是个啥? 细胞培养中出现的“小黑点”,可能是以下几种情况: 细菌污染如果细胞被细菌污染,培养基会变浑浊、变黄,细胞状态会明显变差。在显微镜下,黑点会游动或翻滚,这和布朗运动不一样。 细胞残骸细胞老化后,可能会出现破碎的细胞残骸,看起来像是“小黑点”。 血清沉淀血清经过反复冻融后,会产生沉淀,看起来像是“小黑点”。如果血清经过热灭活,沉淀物会更多。 培养基pH值问题如果培养基的pH值偏高,细胞生长环境不好,也可能出现“小黑点”。 原代细胞中的杂质如果是培养原代细胞,出现的“小黑点”可能是原代组织中的杂质,多次传代可以消除。 二、怎么处理“小黑点”? 确认是否为细菌污染 观察培养基是否变浑浊、变黄。 细胞状态是否明显变差。 显微镜下观察黑点是否游动或翻滚。 如果是细菌污染,建议使用消毒剂处理后直接丢弃;如果细胞比较珍贵,可以用5-10倍的抗生素冲洗24-48小时,再换成常规培养基。 细胞残骸 离心300-500rpm,3分钟,分离完整细胞和碎片。 掌握细胞传代的最佳时机,减少血清冻融次数。 血清沉淀 尽量减少血清冻融次数。 如果血清经过热灭活,沉淀物会更多,建议不进行热灭活操作。 培养基pH值问题 将培养基配制成适宜细胞生长的pH值。 原代细胞中的杂质 如果是原代细胞,多次传代可以消除杂质。 三、总结:细胞培养中的“小黑点”,别慌! 细胞培养中出现“小黑点”虽然让人头疼,但只要找到原因,就能轻松解决!确认是否为细菌污染,如果是,及时处理;如果不是,根据具体情况采取相应措施。只要注意这些细节,细胞就能健康生长! 毕合生物提供服务内容:分子生物学、免疫, 重组蛋白及ELISA相关、活性小分子化合物、高端化学、材料化学、细胞资源库与培养相关、生命科学、天然产物 |
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