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[交流] 微生物实验室:菌株保存、复苏与销毁全攻略

微生物实验的时候,菌株的保存、复苏和销毁是不是让你头大?今天就来给大家唠唠这些超重要的实验操作,让你轻松搞定!

一、菌株保存:给菌株找个“家”

平板4℃保存法这是最简单的短期保存方法,适合每周需要转种的质控菌株。把菌株转种到平板上,标记好日期和菌名,放入2-8℃冰箱,保存周期不超过1个月。

磁珠快速冷冻法适合苛氧菌株(如肺炎链球菌、流感嗜血杆菌等)。刮取菌苔,放入含磁珠的保存管,记录信息后立即放入-80℃冰箱。这种方法可以保持细菌1-3年的活性和特性。

甘油肉汤快速冷冻法适用于一般细菌。将对数生长期的细菌刮取放入含10%-15%甘油的高营养肉汤中,记录信息后放入-80℃冰箱。这种方法也可以保持细菌1-3年的活性。

干燥冷冻法适用于一般细菌。用厚的无菌滤纸片从平皿上刮取细菌苔,放入灭菌管中,先在-20℃冰冻,再移入-80℃冰箱。这种方法同样可以保持细菌1-3年的活性。

二、菌株复苏:让菌株“复活”

干燥冷冻法保存的菌株用无菌镊子取出滤纸片,放入无菌肉汤管,然后在培养基上划线接种。操作完后立即将菌株放回原保存位置。

甘油肉汤快速冷冻法保存的菌株用接种环挑取一环后直接划线接种,无需解冻。操作完后立即将菌株放回原保存位置。

磁珠快速冷冻法保存的菌株从-80℃冰箱取出,室温解冻后,用接种环挑取一颗磁珠,接种到平板上。

新购置菌株

初次复苏时,应批量保存在菌种管中,放入-80℃冰箱。

新菌株复苏后,传代最多不超过3次,超过3次将不再作为标准菌株使用。

三、菌株销毁:安全处理很重要

菌株销毁时,一定要确保安全!对于有较强抵抗力和强致病性的芽胞菌株(如炭疽杆菌、肉毒梭状芽胞杆菌等),应进行高压蒸汽灭菌。第一次高压灭菌后,放入35℃孵箱培养,使芽胞繁育成繁殖体,再进行第二次高压灭菌,确保彻底灭菌。

四、总结:菌株保存、复苏与销毁,微生物实验的“三大法宝”

菌株的保存、复苏和销毁虽然听起来复杂,但只要按照正确的方法操作,就能轻松搞定!给菌株找个合适的“家”,让它们安全“复活”,并安全处理不再需要的菌株,你的微生物实验就能更顺利!

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