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hxdon

铜虫 (著名写手)

[交流] 已知一蛋白质的部分氨基酸序列,怎样克隆编码该蛋白的基因?

已知一蛋白质的部分氨基酸序列,怎样克隆编码该蛋白的基因?
悬赏分:10 - 提问时间2009-6-30 22:48
还有以下问题:
如果已知基因的一段DNA序列,如何获得(克隆)该基因?
如果已知基因的两段DNA序列,如何获得(克隆)该基因?
已知分离、纯化某蛋白质,并制备了相应的抗体,如何克隆其编码基因?
如果已获得某基因的DNA序列,如何研究其结构?

[ Last edited by amisking on 2009-11-6 at 21:43 ]
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红多多

木虫 (正式写手)

版筑饭牛的日子

★ ★ ★ ★ ★
1949stone(金币+5,VIP+0):哈哈 热心的人 下回我就不留言了 直接给您金币了啊 11-6 17:05
我怀疑这是你们老师给你们布置的作业题目

已知一蛋白质的部分氨基酸序列,怎样克隆编码该蛋白的基因?
这个很不好弄,因为有一个简并性的问题。建议在蛋白数据库搜索同源蛋白,然后对应搜出的基因,设计引物PCR作出全长。(假设你搜出的蛋白对应基因有全长的)

如果已知基因的一段DNA序列,如何获得(克隆)该基因?
可以做RACE  染色体步移 等等

如果已知基因的两段DNA序列,如何获得(克隆)该基因?
直接设计引物然后用延伸性好一点的酶直接PCR,如果不行就步移,一个一个片段的求得

已知分离、纯化某蛋白质,并制备了相应的抗体,如何克隆其编码基因?
用抗体纯化出正在翻译的蛋白质, 得到其RNA,然后顺藤摸瓜

如果已获得某基因的DNA序列,如何研究其结构?
研究DNA结构要制备晶体做X 衍射,RNA结构也大致相同,但更复杂,蛋白质结构就把DNA翻译成蛋白质,然后上数据库上分析蛋白空间结构。
可以用QQ找我……
2楼2009-11-06 17:03:40
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主


hxdon(金币+1,VIP+0): 11-6 21:05
blast搜索啊,由部分氨基酸序列先搜索获得全部氨基酸序列,然后再在NCBI里面很轻松就会获得基因的序列信息,统统进行blast搜索
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
3楼2009-11-06 17:05:11
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hxdon

铜虫 (著名写手)

谢谢1楼,现在没金币了!有金币的话,再给你!这题是中科院的博士入学考试试题!
4楼2009-11-06 21:19:33
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