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yangfangfang

铁虫 (初入文坛)

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[交流] 焦磷酸测序

请问：PCR引物在焦磷酸测序技术中为什么要5’端生物素标记？

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各位基础老师们，看完中央《从严治党》的决定后，对学术界更加有信心了吧已经有5人回复

1楼 2009-11-06 15:24:18

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红多多

木虫 (正式写手)

版筑饭牛的日子

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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+2,VIP+0): 11-6 16:55

我觉得可能是这样的，标记后能把后面的加合上去的核苷酸和本来引物的核苷酸区分开来，从而形成一个统一的信号起点。首先你合成的引物可能不完整吧，假设5’ 端的不完整或是发生降解，这条没有正确5’ 起始的合成链就没有起始信号，在后面的PPi 反应产生的荧光就不识别。如果3’ 降解几个核苷酸则不影响，因为5’ 的标记还在，减去引物的nt数就能知道哪一个信号是第一个加合上去的信号了。

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可以用QQ找我……

3楼2009-11-06 16:48:06

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yangfangfang

铁虫 (初入文坛)

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Originally posted by 红多多 at 2009-11-6 16:48:
我觉得可能是这样的，标记后能把后面的加合上去的核苷酸和本来引物的核苷酸区分开来，从而形成一个统一的信号起点。首先你合成的引物可能不完整吧，假设5’ 端的不完整或是发生降解，这条没有正确5’ 起始的合成链 ...

荧光信号的产生与引物5‘端生物素标记有直接联系吗？
我是跨专业的，以前学的是化学，对这方面了解的不是很全面。谢谢指导了。

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4楼2009-11-09 11:02:13

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