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Deluxe

铜虫 (小有名气)

[交流] 各位大侠帮帮忙

有人做过脂肪细胞的染色吗 我们用油红O染料  怎末最近腙染不上颜色啊 甲醛固定 染完之后还可以看见没有着色的脂肪细胞 以前用同样的方法染的也不错 难道油红染料会过期失效吗
请教各位高手
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红多多

木虫 (正式写手)

版筑饭牛的日子

★ ★
Deluxe(金币+2,VIP+0): 11-6 15:55
我记得以前学过油红染料只有母液体可以长期保存,稀释液不能久置的,楼主再稀释一点母液染色试试吧
可以用QQ找我……
2楼2009-11-06 15:40:06
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gyesang

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★ ★ ★ ★ ★
Deluxe(金币+5,VIP+0): 11-6 15:55
油红作为脂肪染色剂,其染色步骤简便,染色结果肯定,并且优于苏丹Ⅳ。
试剂配制:
油红O                 0.5g
异丙醇(含量98%)     100ml
将异丙醇放入三角烧瓶,再加入油红O,于水浴中慢慢加热使之溶解,待至完全溶解后取出,冷却至室温后,过滤,装于棕色小磨沙口瓶保存(此为油红饱和液,可长期保存备用),临用前取6ml加蒸馏水4ml,混合后静置10min后过滤,染色时间5-15min。
水溶液不可长期保存,原液注意棕色瓶避光保存。

染色步骤:
(1)  冻切片
(2)  蒸馏水充分洗涤。
(3)  油红稀释液染10-15分钟,避光、密封。油红稀释液的配制:取油红饱和液6毫升,加蒸馏水4毫升,静置5-10分钟后过滤后使用。
(4)  60%乙醇镜下分化至间质清晰。
(5)  水洗。
(6)  Marry氏苏木素复染核。
(7)  水洗。
(8)  甘油或甘油明胶封片。
结果:脂肪呈鲜红色,细胞核呈蓝色,间质无色。
注意事项:
1.      油红染色时应避免试剂挥发过多,否则易形成背景沉淀。
60%乙醇分化,应于镜下控制至脂肪组织呈鲜红色,间质无色时为度。

[ Last edited by gyesang on 2009-11-6 at 15:45 ]
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3楼2009-11-06 15:44:14
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Deluxe

铜虫 (小有名气)

已经尝试好多次了 现在用的母液都是现配现用 稀释是用的异丙醇 这有影响吗
4楼2009-11-06 15:53:21
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gyesang

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★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
Deluxe(金币+10,VIP+0): 11-26 09:22
引用回帖:
Originally posted by Deluxe at 2009-11-6 15:53:
已经尝试好多次了 现在用的母液都是现配现用 稀释是用的异丙醇 这有影响吗

稀释用6:4ml水做啊,问题就出在这里
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
5楼2009-11-06 15:55:11
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Deluxe

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by gyesang at 2009-11-6 15:55:

稀释用6:4ml水做啊,问题就出在这里

谢啦 作了这么长时间 原来绕了个大圈
6楼2009-11-26 09:22:53
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gyesang

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引用回帖:
Originally posted by Deluxe at 2009-11-26 09:22:

谢啦 作了这么长时间 原来绕了个大圈

现在实验结果正常了没?
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
7楼2009-11-26 09:30:31
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Deluxe

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by gyesang at 2009-11-26 09:30:

现在实验结果正常了没?

预实验已经没问题了 是异丙醇太多把脂肪的红色给溶了吗
8楼2009-11-26 09:32:20
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