| 查看: 1141 | 回复: 0 | |||
[交流]
免疫荧光背景强？这几个妙招轻松搞定！
|
|
做免疫荧光实验的时候，是不是经常遇到背景太强，目标信号被淹没的问题？今天就来给大家唠唠几个超实用的小妙招，让你的实验结果清晰又漂亮！ 一、背景强是个啥问题？ 免疫荧光背景强，就是除了目标信号外，还有其他荧光的干扰，让实验结果看起来“雾蒙蒙”的。这不仅影响染色结果的分析，还可能让你错过重要的实验信息。所以，解决背景强的问题超重要！ 二、背景强的原因及解决方法 切片太厚组织切片太厚，荧光信号就会“叠罗汉”，背景自然就强了。解决方法很简单，切片时尽量切薄一点，一般5-7微米厚就足够啦！ 封闭不佳封闭液没做好，切片就会出现非特异性染色，背景色就会增高。可以尝试换一种封闭液，或者增加封闭时间，让切片充分“封闭”起来。 二抗有特异性结合二抗和一抗不匹配，或者二抗本身有问题，也会导致背景强。解决方法就是更换一种二抗，试试别的品牌或型号。 自体荧光有些动植物组织本身就有荧光，比如水母。如果实验前没有做荧光猝灭，这些自体荧光就会干扰实验结果。所以，实验前一定要做好样本的荧光猝灭处理。 抗体浓度太高抗体浓度过高，孵育时间太长，也会让背景荧光增强。可以尝试降低抗体浓度，或者减少孵育时间，让信号更“纯净”。 三、总结：免疫荧光背景强，这几个妙招轻松搞定！ 免疫荧光背景强虽然让人头疼，但只要找到原因，对症下药，就能轻松解决！切片切薄一点，封闭液做好，二抗选对，自体荧光处理好，抗体浓度控制好，实验结果就能清晰又漂亮！ 毕合生物提供服务内容：分子生物学、免疫, 重组蛋白及ELISA相关、活性小分子化合物、高端化学、材料化学、细胞资源库与培养相关、生命科学、天然产物 |
回复此楼» 猜你喜欢
求调剂
已经有4人回复
-
一志愿北京化工大学070300 学硕336求调剂
已经有6人回复
-
考研调剂
已经有3人回复
-
能源材料化学课题组招收硕士研究生8-10名
已经有16人回复
-
318求调剂
已经有5人回复
-
285求调剂
已经有5人回复
-
306求调剂
已经有3人回复
-
354求调剂
已经有10人回复
-
303求调剂
已经有5人回复
-
环境学硕288求调剂
已经有4人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
