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免疫组化实验“脱片”?这几个妙招轻松搞定!
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做免疫组化实验的时候,是不是经常遇到切片“脱片”的问题?今天就来给大家唠唠几个超实用的小妙招,让你的实验不再“掉片”! 一、脱片问题大揭秘:到底为啥会脱片? 玻片质量不行 买的多聚赖氨酸玻片质量差,那可不行!一定要选质量好的品牌,不然切片就像在“玻璃渣”上跳舞,容易掉下来。 切片机太老 切片机要是老掉牙了,切出来的切片厚薄不均,那可太容易脱片了。就像用钝刀切菜,切出来的肯定不整齐。 烤片时间短 烤片时间不够,温度不够,切片就像没烤熟的面包,一碰就掉。一定要烤到位,让切片牢牢地“粘”在玻片上。 操作太猛 操作的时候甩得太猛,切片容易被“甩飞”。有脱片嫌疑的片子,最好轻轻甩,或者用卫生纸从边缘慢慢吸水。 修复时间过长 抗原修复时高压时间过长,或者放进修复液时手法不好,切片很容易“飞走”。特别是用EDTA修复,比柠檬酸更容易脱片,一定要小心。 组织有问题 如果样本组织有坏死,那可太容易脱片了。一定要确保样本组织新鲜,没有坏死。 二、解决脱片问题的“秘籍” 选好玻片 一定要选质量好的多聚赖氨酸玻片,这是基础中的基础!就像给切片建一个“稳固的家”。 检查切片机 定期检查切片机,确保机器状态良好。如果机器太老,该换就换,别心疼钱! 烤片要到位 烤片时间要足够,温度要合适。一般来说,烤片时间不能少于30分钟,温度要达到60℃左右。这样切片才能牢牢地“粘”在玻片上。 操作要轻柔 操作的时候动作一定要轻柔,特别是有脱片嫌疑的片子,更要小心。轻轻甩,慢慢吸水,别让切片“受惊”。 修复要小心 抗原修复时,高压时间要控制好,一般不超过10分钟。放进修复液时动作要轻,别“咚”的一声丢进去。小心轻放,切片才会乖乖的。 处理组织 确保样本组织新鲜,没有坏死。如果有坏死组织,一定要剔除干净。 三、总结:免疫组化实验,脱片不再怕! 免疫组化实验虽然容易脱片,但只要注意这些细节,就能轻松搞定!选好玻片,检查切片机,烤片要到位,操作要轻柔,修复要小心,处理组织要新鲜。这些细节做好了,脱片问题就能大大减少! 毕合生物提供服务内容:分子生物学、免疫, 重组蛋白及ELISA相关、活性小分子化合物、高端化学、材料化学、细胞资源库与培养相关、生命科学、天然产物 |
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