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ychh521

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
可能是模板量过大,造成非特异性扩增片段太少。
21楼2009-11-14 18:52:33
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hrbd1985

铁虫 (初入文坛)

哦,PCR啊,这个变异比较大,每次都要摸条件,杂带那么多,提高退货温度试试?
22楼2009-11-14 21:55:15
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zhangsuobing

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lz还是再验证一下:若CK还能扩出带来,则把所有试剂全部换掉。因为某个污染了,当然也可以找出来。若CK扩不出来,而其它的样品仍出现marker状。提高退火温度看看,可做个梯度PCR。当然有个前提,你的引物在基因组中必须是特异的。
祝你好运!

[ Last edited by zhangsuobing on 2009-11-15 at 09:05 ]
23楼2009-11-15 09:03:05
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yangxiaofei


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
如果之前条件很好,应该不是条件的问题。很可能是什么污染了或者坏了。如果引物放4度的话,很可能是引物坏了。建议换引物和buffer,水也很可能污染了。
24楼2009-11-15 09:27:35
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cherylshen

木虫 (正式写手)

谢谢各位,最近调整了一下PCR条件,退火温度也稍稍提高了一点,已经解决问题了,谢谢。
25楼2009-11-30 09:42:01
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