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[交流]
蛋白纯化仪使用经验交流——大家遇到这些问题了吗？已有3人参与
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最近实验室的蛋白纯化仪频繁出现流速不稳定的问题，尤其是纯化包涵体时，柱子动不动就堵住，缓冲液换了几种还是效果不好……想和大家讨论几个常见痛点： 1. 低浓度蛋白回收率低 目标蛋白浓度＜1mg/mL时，洗脱峰总是不理想，试过调整上样量和结合时间，但收率还是上不去，有没有优化建议？ 2. 非特异性结合严重 特别是粗提液中杂蛋白多的时候，镍柱/离子柱的背景吸附明显，大家一般怎么预处理样品？ 3. 仪器维护成本 配件（比如泵密封圈、UV灯）更换频率比预期高，有没有延长使用寿命的小技巧？ PS：最近试了梯度洗脱延长至5CV，杂带少了些，但时间成本翻倍了……） |
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