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生物学研究的“超级神器”
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生物学研究的“超级神器” 做分子生物学实验的时候，有没有听说过“双荧光素酶报告系统”？这可是近年来超火的研究工具，能帮你轻松搞定基因调控、miRNA功能验证，甚至药物筛选！ 一、双荧光素酶报告系统是个啥？ 简单来说，双荧光素酶报告系统就是一种超厉害的实验技术，它利用两种荧光素酶（萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶）来检测基因表达和调控元件的活性。 二、它的原理超简单！ 荧光素酶反应 萤火虫荧光素酶：在ATP、镁离子等条件下，催化荧光素氧化，发出黄绿色荧光 海肾荧光素酶：催化腔肠素与氧气反应，发出蓝色荧光 这两种荧光素酶发出的光可以通过仪器检测到，而且它们的发光强度和基因表达水平是成正比的哦 报告基因的应用 把感兴趣的基因调控元件（比如启动子、增强子）和荧光素酶基因拼接在一起，构建成报告基因载体。当细胞里的调控元件被激活时，荧光素酶基因就会表达，发出荧光。 三、系统组成：实验的“装备库” Arsenal 检测试剂 萤火虫荧光素酶检测试剂：包含荧光素、ATP、镁离子等，能检测到萤火虫荧光素酶发出的光。 海肾荧光素酶检测试剂：含有腔肠素，用于检测海肾荧光素酶的活性。 这些试剂就像是“荧光探测器”，能精准地捕捉到荧光素酶发出的光信号！ 报告基因载体 萤火虫荧光素酶载体：把目标基因的启动子区域克隆到荧光素酶基因前面，构建成重组载体。 海肾荧光素酶载体：通常含有稳定的启动子（如SV40），用于校正实验误差。 这两种载体就像是“荧光探针”，帮助我们精准地检测基因调控的变化！ 四、主要应用：实验界的“多面手” 基因转录调控研究 想知道某个基因的启动子是否被激活？把启动子区域克隆到荧光素酶基因前面，转染细胞后检测荧光强度，就能知道启动子的活性啦！ miRNA功能研究 miRNA是不是真的能调控某个基因？把基因的3'UTR区域克隆到荧光素酶基因后面，如果miRNA能结合，荧光就会减弱，这就证明miRNA起作用啦！ 药物研发 想筛选能调控基因表达的药物？用双荧光素酶报告系统，加入药物后观察荧光变化，就能快速找到目标药物，简直不要太方便！ 五、实验流程：轻松上手的“操作指南” 细胞转染 把构建好的萤火虫荧光素酶载体和海肾荧光素酶载体共转染到细胞里 培养与诱导 转染后的细胞在合适条件下培养，让荧光素酶基因表达 荧光检测 先加入萤火虫荧光素酶检测试剂，检测黄绿色荧光；再加入海肾荧光素酶检测试剂，检测蓝色荧光。 毕合生物提供服务内容：分子生物学、免疫, 重组蛋白及ELISA相关、活性小分子化合物、高端化学、材料化学、细胞资源库与培养相关、生命科学、天然产物 |
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