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毕合生物2024

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[交流] &#127775;流式细胞术检测细胞凋亡：超全操作指南✨

做细胞凋亡实验的时候，是不是经常被各种细节搞得头大？今天就来给大家分享流式细胞术检测细胞凋亡的超全操作指南，让你的实验“一次成型”！

一、细胞凋亡是个啥？

细胞凋亡就像是细胞的“自杀程序”，细胞会变得圆滚滚的，和周围细胞“拜拜”，然后细胞膜向内皱缩，胞浆浓缩，最后被

吞噬细胞“吃掉”。这个过程很“安静”，不会引起炎症反应。所以，检测细胞凋亡对于研究细胞死亡机制超重要哦！

二、流式细胞术检测细胞凋亡：关键步骤

诱导培养时间要准确

诱导细胞凋亡的时间一定要卡准，不然细胞要么还没开始凋亡，要么已经“死透”了，实验结果就不准啦！

试剂操作要小心

Annexin V-FITC和PI是光敏物质，操作时一定要避光，不然荧光会“跑光”，影响结果。而且PI对皮肤有刺激，操作时要戴好手套，保护好自己哦！

细胞洗涤要干净

洗涤细胞时，要把上清弃干净，避免残留的PBS影响实验结果。就像洗衣服一样，一定要把“脏东西”洗干净！

染色时间要控制好

PI染色时间过长可能会让检测的凋亡率偏高，所以建议先进行Annexin V-FITC染色，上机前5分钟再加入PI染色。这样就能避免“假阳性”啦！

操作要轻柔

整个操作过程动作要轻柔，不要用力吹打细胞，尽量在4℃下操作。细胞很“脆弱”，轻一点才能让它们“乖乖的”！

检测要及时

荧光显微镜下观察细胞时，荧光很容易“碎灭”，所以观察要快，反应完毕后尽快检测。细胞凋亡是一个动态过程，拖久了荧光强度就会下降哦！

三、实验小贴士：避免“坑”的秘籍

优化实验条件

成功的凋亡检测受多种因素影响，比如细胞类型、细胞膜上PS的密度、诱导凋亡的方法等。把这些因素优化好，实验才能成功哦！

注意保护自己

实验过程中要注意保护好自己，戴好手套，避免试剂对皮肤和眼睛的刺激。安全第一，实验才能顺利进行！

记录详细

实验过程中要详细记录每一步操作，包括试剂用量、操作时间等。这样即使出现问题，也能快速找到原因并解决哦！

四、总结：流式细胞术检测细胞凋亡，细节决定成败！

流式细胞术检测细胞凋亡虽然有点复杂，但只要用心，就能成功。诱导时间要准确，试剂操作要小心，细胞洗涤要干净，染色时间要控制好，操作要轻柔，检测要及时。这些细节做好了，实验结果自然就准确啦！

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