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铜虫 (小有名气)

[交流] 细胞运动实验大总结!总有你喜欢的那一款

做细胞实验的时候,是不是经常被细胞运动实验搞得头大?今天就来给大家一次性搞清楚细胞运动实验的三种常用方法:划痕实验、侵袭实验和趋化实验!

一、划痕实验:细胞的“跑步测试”

划痕实验是研究细胞迁移能力的超简单方法。在体外培养的单层细胞上划一道“伤痕”,然后观察细胞“跑步”填平伤口的速度。这种方法超直观,能快速看出细胞的迁移能力。就像给细胞来一场“百米冲刺”!

二、侵袭实验:细胞的“障碍赛”stacle Course

侵袭实验就像是细胞的“障碍赛”。用一层涂有基质胶的膜把高营养和低营养的培养液隔开,细胞为了“找吃的”,必须穿过这层膜。这个过程模拟了细胞在体内穿过基底膜的过程,特别适合研究肿瘤细胞的侵袭能力。就像让细胞穿越“丛林障碍”,看看谁更厉害!

实验步骤:

准备基质胶:Matrigel在4℃过夜融化,用无血清培养基稀释至1 mg/mL,冰上操作。

铺胶:在chamber上室底部加入100 μL稀释后的Matrigel,37℃温育4-5小时,让其干成胶状。

细胞准备:待测细胞培养至对数生长期,消化后用无血清培养基悬浮,计数。

加样:下室加入含10%血清的培养基,上室加入细胞悬液,继续培养24小时。

固定和染色:取出chamber,固定、染色,最后显微镜下计数。

三、趋化实验:细胞的“寻宝游戏”

趋化实验就像是细胞的“寻宝游戏”。细胞会根据化学信号的引导,从一个地方移动到另一个地方。这个实验可以研究细胞对特定化学物质的反应,比如趋化因子或细胞分泌物。就像给细胞发一张“藏宝图”,看看它们能不能找到“宝藏”!

实验设计:

细胞A对细胞B的趋化作用:将细胞A种在上室,细胞B种在下室,研究细胞B对细胞A的趋化作用。

趋化因子对细胞的趋化作用:将细胞种在上室,下室加入趋化因子,研究细胞对趋化因子的反应。

四、实验小贴士:避免“坑”的秘籍

Matrigel操作:Matrigel在过高或过低的温度都会凝固,所以操作时枪头和离心管要提前在4℃预冷。

铺胶均匀:铺胶时保证液面水平,胶的厚度均匀一致,避免气泡。

避免污染:每次实验可以准备一块普通培养板,避免操作污染。

标记清晰:Chamber和膜上无法标记,操作时要小心区分实验组和对照组。

晾干彻底:固定和染色后要充分晾干,避免残留水分影响观察。

五、总结:细胞运动实验,总有适合你的那一款!

细胞运动实验虽然种类多,但每种方法都有自己的“拿手好戏”。划痕实验适合快速观察细胞迁移能力;侵袭实验适合研究细胞的侵袭能力;趋化实验适合研究细胞对化学信号的反应。根据实验需求,选择最适合的方法,就能轻松搞定!

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