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汕头大学海洋科学接受调剂
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liutieju

银虫 (初入文坛)

[交流] 请教目的基因扩增问题

我有一个含目的基因的质粒,现在我想从这个质粒上通过PCR扩增出目的基因并同时加上酶切位点,再连到另一个载体上。请问什么方法从质粒上扩增目的基因比较好?直接以质粒为模板或酶切后再跑PCR呢?谢谢。
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qqsvery

木虫 (著名写手)

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1949stone(金币+1,VIP+0):谢谢交流 11-4 08:54
我做的是先将质粒酶切,一般下午2点开始,到第二天取出做PCR,设计好特异性引物,就可以把目的基因很好的扩增出来,效果不错,不妨试试!
谎言和真实在河边洗澡,谎言先洗好,穿走了真实的衣服,真实却不肯穿谎言的衣服。后来人们眼里只有穿着真实衣服的谎言,却很难接受赤裸裸的真实。
3楼2009-11-04 08:22:36
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fykxy_206

木虫 (正式写手)

★ ★
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amisking(金币+1,VIP+0): 11-4 08:12
质粒上一般都有酶切的位点,可以以质粒为模板选择引物PCR,然后再酶切。
2楼2009-11-04 08:07:49
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kitty8682

金虫 (正式写手)

★ ★
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1949stone(金币+1,VIP+0):谢谢交流 11-4 08:55
直接从质粒上PCR就可以
4楼2009-11-04 08:39:49
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gxsulong

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
直接以质粒为模板,在设计引物的时候加上你想要的酶切位点就可以。
霉菌
5楼2009-11-04 09:15:09
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