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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 双酶切问题
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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)
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引用回帖:
Originally posted by 小白3521 at 2009-11-2 22:22:


呃...我是用的TAKARA的
那用什么牌子的酶切的比较好呢
我切了3h，看到了一点点，又做了一些，放到明天早上看看结果

一直用Fermentas的，感觉很好。
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11楼2009-11-02 22:24:10
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plantst5928

铜虫 (小有名气)
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TAKARA的酶效率比较低，要多加一些，时间长点没关系，我一般切过夜，切得很好，这个体系还可以，不过要根据你的质粒的质量来决定你的酶切体系，如果质粒比较浓，可以把体系加大，尝试50ul体系。
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12楼2009-11-02 23:41:38
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timdunken

新虫 (初入文坛)
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切三个小时应该是没问题的，应该是质粒加多了，根据你质粒跑胶的亮度，如果和marker差不多亮，可以尝试一下30ul加个10-15
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13楼2009-11-04 10:22:24
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xingshi100

木虫 (小有名气)
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建议你用fermentas的酶，它毕竟是国际上三大顶级制造限制性内切酶公司。
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14楼2009-11-04 19:21:11
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xht

铜虫 (小有名气)
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xho 1的酶切效率低, 我做的时候是用的分步酶切, 先用xho1 过夜切, 失活后,再用另一个酶切,这样切完后检测,酶切很彻底
NEB的内切酶比较好些
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15楼2009-11-04 20:26:11
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