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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 小白3521 at 2009-11-2 22:22:


呃...我是用的TAKARA的
那用什么牌子的酶切的比较好呢
我切了3h,看到了一点点,又做了一些,放到明天早上看看结果

一直用Fermentas的,感觉很好。
11楼2009-11-02 22:24:10
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plantst5928

铜虫 (小有名气)


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TAKARA的酶效率比较低,要多加一些,时间长点没关系,我一般切过夜,切得很好,这个体系还可以,不过要根据你的质粒的质量来决定你的酶切体系,如果质粒比较浓,可以把体系加大,尝试50ul体系。
12楼2009-11-02 23:41:38
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timdunken

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
切三个小时应该是没问题的,应该是质粒加多了,根据你质粒跑胶的亮度,如果和marker差不多亮,可以尝试一下30ul加个10-15
13楼2009-11-04 10:22:24
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xingshi100

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
建议你用fermentas的酶,它毕竟是国际上三大顶级制造限制性内切酶公司。
14楼2009-11-04 19:21:11
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xht

铜虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
xho 1的酶切效率低, 我做的时候是用的分步酶切, 先用xho1 过夜切, 失活后,再用另一个酶切,这样切完后检测,酶切很彻底
NEB的内切酶比较好些
15楼2009-11-04 20:26:11
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