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suiliucai

金虫 (小有名气)

[交流] 关于pEGFP-N1载体的相关问题

敝人刚刚接触分子生物学实验这块,老板交给一个任务,构建一个猪相关基因真核表达的载体,选来选去,选择了这个骨架载体,但对于这个载体的相关信息不是很了解,烦高手指教一番,我想把相关基因的全序列连上去,全长大约5kb左右,不知是否可行?因为全序列中含有三个内含子,不知与EGFP相连,会不会影响其表达效果?

[ Last edited by suiliucai on 2009-11-2 at 16:06 ]
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
GFP很小的,不怕,只是个融合标签
2楼2009-11-02 16:58:42
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bioxixi

木虫 (著名写手)

★ ★
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amisking(金币+1,VIP+0): 11-2 17:48
全序列中含有三个内含子...
你连的是基因组啊 还是连mRNA吧
3楼2009-11-02 17:17:35
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

楼主看来果然是新手,要多多学习啊,加油。。。。。!
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
4楼2009-11-02 18:25:55
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suiliucai

金虫 (小有名气)

O(∩_∩)O~,是哦,有这个实验设计是因为当初看了一篇类似的文献,就是连的整个基因组,我定了引物,按照其PCR反应条件,没有批出来,看来文献也不可信啊,我决定连其mRNA试试看,谢谢大家啊
5楼2009-11-03 08:41:42
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bioxixi

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by suiliucai at 2009-11-3 08:41:
O(∩_∩)O~,是哦,有这个实验设计是因为当初看了一篇类似的文献,就是连的整个基因组,我定了引物,按照其PCR反应条件,没有批出来,看来文献也不可信啊,我决定连其mRNA试试看,谢谢大家啊

批基因组本身也是很难的。。。
有些文献的反应条件重复性也不好,要是有相关文献就多看一些吧,综合一下选更好的
6楼2009-11-03 11:16:51
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